【摘要】：目的原代培養(yǎng)新生大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞,建立高糖模型后,探討左卡尼汀對(duì)高糖條件下視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用。 方法取出生后1-3d SD)大鼠視網(wǎng)膜,0.25%胰蛋白酶消化制成不同大小細(xì)胞團(tuán)的懸液,接種于包有多聚賴(lài)氨酸的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化,取義7-9天細(xì)胞進(jìn)行神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)免疫熒光鑒定。取8-10天的細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)為5組：正常細(xì)胞培養(yǎng)組(對(duì)照組)、高糖模型組、高糖模型組+左卡尼汀(50μmol/L)、高糖模型組+左卡尼汀(100μmol/L)、高糖模型組+左卡尼汀(200μmol/L),用MTT法檢測(cè)細(xì)胞OD值來(lái)反映視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞活性,以電子自旋共振法(ESR)檢測(cè)各組一氧化氮(N0)及活性氧(ROS)的釋放來(lái)反映氧化應(yīng)激程度。 結(jié)果免疫熒光顯示,培養(yǎng)的細(xì)胞大部分抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體反應(yīng)陽(yáng)性。MTT結(jié)果顯示高糖模型細(xì)胞活性顯著降低(P＜0.05),左卡尼汀濃度200μmol/L,作用時(shí)間48h時(shí)對(duì)視網(wǎng)膜的保護(hù)作用最好。濃度200μmol/L時(shí),對(duì)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。ESR檢測(cè)結(jié)果示高糖使細(xì)胞生成NO、ROS增多(p＜0.01),左卡尼汀能明顯抑制NO、ROS的生成。 結(jié)論高糖條件下視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞NO、ROS生成增多；左卡尼汀能抑制高糖條件下視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R774.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2560713