【摘要】：目的:通過觀察在模擬5000m高海拔缺氧條件下大鼠視網(wǎng)膜組織病理形態(tài)改變、細胞早期凋亡率、caspase-3和p53的表達,探討急性高海拔視網(wǎng)膜病變的發(fā)生機制。方法:成年雌性wistar大鼠70只,隨機分入對照組和實驗組。對照組10只,飼養(yǎng)于海拔高度為1500m的室內(nèi)環(huán)境(蘭州市海拔高度,氧分壓為17.6 k Pa);實驗組60只,分為6組,每組10只,分別飼養(yǎng)于模擬海拔高度為5000m的高原環(huán)境模擬實驗艙(氧分壓為11.3 k Pa)中2h、6h、12h、24h、48h、72h。各組大鼠處死后,迅速摘除眼球行HE染色觀察大鼠視網(wǎng)膜病理形態(tài)的改變;行免疫組化染色觀察大鼠視網(wǎng)膜caspase-3和p53的表達,采用IPP軟件計算陽性細胞的平均吸光度值(A),并分析caspase-3與p53表達的相關(guān)性;通過流式細胞儀檢測視網(wǎng)膜細胞早期凋亡率。結(jié)果:1.HE染色結(jié)果:對照組大鼠視網(wǎng)膜各層組織結(jié)構(gòu)清楚、完整,厚度均勻一致,神經(jīng)節(jié)細胞呈單層排列,細胞核較大,呈橢圓形;實驗組大鼠視網(wǎng)膜各層組織水腫疏松,視網(wǎng)膜厚度增加,排列層次紊亂,神經(jīng)節(jié)細胞層出現(xiàn)空泡變性,并隨著缺氧時間延長視網(wǎng)膜病理損傷越明顯。2.視網(wǎng)膜caspase-3、p53表達結(jié)果:對照組大鼠視網(wǎng)膜組織中p53、caspase-3僅在神經(jīng)節(jié)細胞層有微量表達或不表達;實驗組caspase-3和p53在模擬缺氧損傷2h后即檢測到表達,并隨著缺氧時間延長,兩者表達逐漸增加,差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。通過Spearman相關(guān)性分析,大鼠視網(wǎng)膜組織中caspase-3與p53的表達水平呈正相關(guān)(r=0.832,P0.001)。3.視網(wǎng)膜細胞早期凋亡率檢測結(jié)果:對照組平均細胞早期凋亡率為0.46%;實驗組細胞早期凋亡率隨缺氧時間延長逐漸升高,48h組升高明顯。2h組與對照組比較無顯著性差異(P=0.213);其余各組兩兩比較,差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.01)。結(jié)論:1.模擬5000m高海拔缺氧條件可造成大鼠視網(wǎng)膜的組織損傷,導(dǎo)致視網(wǎng)膜出現(xiàn)病理形態(tài)改變。2.細胞凋亡可能參與了模擬高海拔缺氧的大鼠視網(wǎng)膜損傷機制,并通過caspase-3依賴的凋亡通路發(fā)揮作用。
【圖文】：

學碩士學位論文 急性高海拔視網(wǎng)膜病變機制的實驗研究12圖-1 模擬 5000m 高海拔缺氧不同時間點的大鼠視網(wǎng)膜的組織病理圖像（HE ×400）（1A:對照組；1B:2h 組；1C:6h 組；1D：12h 組；1E:24h 組；1F:48h 組；1G：72h 組）

學碩士學位論文 急性高海拔視網(wǎng)膜病變機制的實驗研究16圖-2 模擬 5000m高海拔缺氧不同時間點的大鼠視網(wǎng)膜免疫組織化學染色圖像（DBA×400）。（p53 的表達：2A:對照組；2B:2h 組；2C:6h 組；2D：12h 組；2E:24h 組；2F:48h 組；2G：72h 組。caspase-3 的表達：3A:對照組；3B:2h 組；3C:6h 組；3D：12h 組；3E:24h 組；3F:48h組；3G：72h 組。）表-1 模擬 5000m 高海拔缺氧不同時間點的大鼠視網(wǎng)膜 p53、caspase-3 表達比較 ( x sn=5)p53 caspase-3組別 對照組 實驗組 對照組 實驗組對照組 0.087±0.031 — 0.076±0.012 —2h — 0.121±0.011 — 0.113±0.0076h — 0.162±0.014 — 0.158±0.03212h — 0.213±0.021 — 0.273±0.05724h — 0.356±0.063 — 0.394±0.02148h — 0.391±0.037 — 0.429±0.01872h — 0.421±0.028 — 0.461±0.063注：模擬 5000m 高海拔缺氧不同時間點的各實驗組與對照組相比較，p53 和 caspase-3 的表達均有統(tǒng)計學差異，，P<0.05。
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R774.1

【參考文獻】

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本文編號：2551970