【摘要】：目的:觀察藍(lán)光對人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響并初步探討其可能機制。方法:利用35 W白色冷光燈加用藍(lán)色濾光片建立藍(lán)光損傷體外培養(yǎng)的RPE細(xì)胞模型,藍(lán)光控制波長范圍在470~520nm,光照強度在2000lux左右,利用流式細(xì)胞儀和激光共聚焦顯微鏡檢測RPE細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,利用Western blot技術(shù)和膜片鉗技術(shù)分別檢測RPE細(xì)胞Cav1.2蛋白的表達(dá)和L型電壓依賴性鈣離子通道的功能。結(jié)果:與對照組相比,照射組的RPE細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度增加;照射后RPE細(xì)胞Cav1.2蛋白表達(dá)增加,且L型電壓依賴性鈣離子通道功能增強。結(jié)論:藍(lán)光可通過增加RPE細(xì)胞Cav1.2蛋白表達(dá)和L型電壓依賴性鈣離子通道的功能促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的增加,從而引起RPE細(xì)胞的損傷,L型電壓依賴性鈣離子通道有望成為治療年齡相關(guān)性黃斑變性等視網(wǎng)膜變性疾病的新靶點。
[Abstract]:Aim: to observe the effect of blue light on intracellular calcium concentration of human retinal pigment epithelium (RPE) and to explore its possible mechanism. Methods: the model of RPE cells injured by blue light was established by using 35 W white light lamp and blue filter. The wavelength of blue light control was 470 nm and the intensity of light was about 2000lux. Flow cytometry and confocal laser microscopy were used to detect intracellular free calcium concentration in RPE cells. Western blot and patch clamp techniques were used to detect the expression of Cav1.2 protein and the function of L-type voltage-dependent calcium channels in RPE cells. Results: compared with the control group, the concentration of free calcium in RPE cells was increased, the expression of Cav1.2 protein and the function of L-type voltage-dependent calcium channels were increased in RPE cells after irradiation. Conclusion: blue light can promote the increase of intracellular free Ca ~ (2 +) concentration by increasing the expression of Cav1.2 protein and the function of L-type voltage-dependent calcium channel in RPE cells, thus causing damage to RPE cells. L-type voltage-dependent calcium channel is expected to be a new target for the treatment of age-related macular degeneration.
【作者單位】： 西安市第一醫(yī)院眼科;西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年基金資助項目(30901644)
【分類號】：R774.1

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