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Testin基因?qū)Ω咿D(zhuǎn)移鼻咽鱗狀細(xì)胞癌的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-07-02 13:38

  本文選題:Testin基因 + 鱗狀細(xì)胞癌; 參考:《臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志》2017年21期


【摘要】:目的:探討Testin(TES)基因?qū)θ吮茄树[狀細(xì)胞癌株5-8F細(xì)胞增殖、遷移的影響。方法:以RTPCR法從人鼻咽鱗狀細(xì)胞癌株5-8F細(xì)胞獲得目的基因,構(gòu)建真核表達(dá)載體pEGFP-N1-TES,采用PCR、基因測(cè)序等對(duì)其進(jìn)行鑒定;然后將其轉(zhuǎn)導(dǎo)入人高轉(zhuǎn)移鼻咽鱗狀細(xì)胞癌株5-8F中,通過RT-PCR法及Western-blot法對(duì)其進(jìn)行鑒定。接著采用流式細(xì)胞術(shù)、劃痕試驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后5-8F細(xì)胞增殖及遷移能力的影響。結(jié)果:轉(zhuǎn)染外源性TES基因后,轉(zhuǎn)染外源性TES基因的5-8F細(xì)胞呈現(xiàn)明顯的凋亡,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)表明:在第12、24、48h時(shí),TES組細(xì)胞遷移速率明顯比空載體組和未轉(zhuǎn)染組要慢(P0.01)。結(jié)論:該研究成功建立了能穩(wěn)定高表達(dá)TES的細(xì)胞模型。TES基因在體外可明顯抑制鼻咽癌5-8F細(xì)胞的增殖和降低其遷移運(yùn)動(dòng)能力,可能是一種潛在的抑癌基因。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of Testin (tes) gene on proliferation and migration of human nasopharyngeal squamous cell carcinoma cell line 5-8F. Methods: the target gene was obtained from human nasopharyngeal squamous cell carcinoma cell line 5-8F by RT-PCR, and the eukaryotic expression vector pEGFP-N1-TESwas constructed and identified by PCRand gene sequencing, and then transferred into human nasopharyngeal squamous cell carcinoma cell line 5-8F with high metastasis. It was identified by RT-PCR and Western-blot. Flow cytometry and scratch test were used to detect the effect of transfection on the proliferation and migration of 5-8 F cells. Results: after transfection of exogenous tes gene, 5-8F cells transfected with exogenous tes gene showed obvious apoptosis (P0.05). The cell scratch test showed that the migration rate of cells in the tes group was slower than that in the empty vector group and the untransfected group (P0.01). Conclusion: this study successfully established a stable and highly expressed tes cell model. Tes gene can significantly inhibit the proliferation of nasopharyngeal carcinoma 5-8F cells and reduce its migration and motor ability in vitro. It may be a potential tumor suppressor gene.
【作者單位】: 武漢大學(xué)中南醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;湖北省第三人民醫(yī)院耳鼻咽喉科;
【基金】:湖北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No:2009CBD420)
【分類號(hào)】:R739.63

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