本文選題：糖尿病視網(wǎng)膜病變 + 血管新生��； 參考：《天津醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：目的： 糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)是糖尿病主要的微血管并發(fā)癥之一,以血管新生為病變特征的增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變(PDR)是糖尿病患者致盲的重要原因。已有研究表明糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)水平與增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)關(guān)系,即AGEs可能參與PDR發(fā)病。我們前期研究結(jié)果提示第V結(jié)構(gòu)域缺失型β2糖蛋白Ⅰ(p2-GPI Domain I-IV)可抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞血管新生。本研究以猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞(RF/6A)為研究對象,旨在探討： 1.DI-IV對AGEs促RF/6A血管新生作用的影響； 2.DI-IV影響AGEs促RF/6A血管新生作用的機(jī)制。 方法： 1.培養(yǎng)RF/6A細(xì)胞。實驗共分為5組：①NC組為對照組不加干預(yù)因素；②GEs組加入100μg/ml AGEs;③10nM DI-IV組加入100μg/ml AGEs及10nM DI-Ⅳ;④100nM DI-IV組加入100μg/ml AGEs及100nM DI-IV；⑤400nM DI-Ⅳ組加入100μg/ml AGEs及400nM DI-IV。 2.分別用MTS法、“傷口愈合”實驗和體外Matrigel法研究不同濃度DI-IV對AGEs促RF/6A細(xì)胞增殖、細(xì)胞遷移以及新生血管形成的影響。 3.用實時定量PCR法研究DI-IV對AGEs于預(yù)下RF/6A VEGF受體VEGFR-1(Flt-1)、VEGFR-2(KDR) mRNA表達(dá)的影響。 4.用Western Blot法研究DI-IV對AGEs干預(yù)下RF/6A VEGF細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑關(guān)鍵蛋白Akt蛋白磷酸化的影響。 結(jié)果： 1. AGEs能明顯刺激RF/6A細(xì)胞增殖(p0.05),此作用能被不同濃度DI-IV所抑制,其中10nM和400nM DI-Ⅳ的抑制作用最強(qiáng)(p0.01)。 2. AGEs明顯增加RF/6A向裸露區(qū)遷移率達(dá)1.55倍(p0.01),加入不同濃度DI-IV后,這種遷移受到不同程度抑制,其中400nM DI-IV的抑制作用最強(qiáng),高達(dá)47.6%(p0.05) 3. AGEs能明顯促進(jìn)RF/6A體外血管形成達(dá)70%(p0.01),加入不同濃度DI-IV,此血管形成受到不同程度地抑制,其中400nM DI-IV的抑制作用最大,高達(dá)27.4%(p0.05) 4. AGEs能明顯降增加VEGFR-2mRNA表達(dá)量(p0.01),不同濃度DI-IV均能抑制其表達(dá),400nM DI-IV的抑制作用最強(qiáng)(p0.01)。各組間VEGFR-1mRNA表達(dá)量相當(dāng),沒有統(tǒng)計學(xué)差異。 5. AGEs干預(yù)細(xì)胞后,明顯增加Akt蛋白磷酸化(p0.05),不同濃度DI-IV可不同程度地抑制其磷酸化(p0.01) 結(jié)論： 1. AGEs能促進(jìn)RF/6A細(xì)胞增殖、遷移及管腔形成,可能機(jī)制為增加VEGFR-2表達(dá),活化Akt以及下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。 2. DI-Ⅳ能拮抗AGEs促RF/6A細(xì)胞增殖、遷移及管腔形成的作用,可能的機(jī)制為拮抗VEGF/VEGFR-2/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。 3. VEGFR-1在RF/6A細(xì)胞增殖、遷移及管腔形成過程中,作用甚微。
[Abstract]:Objective: diabetic retinopathy (Dr) is one of the main microvascular complications of diabetes mellitus. Proliferative diabetic retinopathy (PDR) characterized by angiogenesis is an important cause of blindness in diabetic patients. Studies have shown that the level of advanced glycation end products (ages) is positively correlated with the severity of proliferative diabetic retinopathy, that is, ages may be involved in the pathogenesis of PDR. Our previous study suggested that 尾 2-GPI Domain I-IV (p2-GPI Domain I-IV) could inhibit angiogenesis of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). The purpose of this study was to investigate the effects of DI-IV on the angiogenesis of ages, and the mechanism of DI-IV on angiogenesis induced by ages. Methods: 1. RFR / 6A cells were cultured. The experiment was divided into 5 groups: control group: 1: 1NC group: control group without intervention factor: group 2GEs: 100 渭 g/ml ages 310nM DI-IV group added 100 渭 g/ml ages and 10nM DI- 鈪，

本文編號：2059790