發(fā)布時間：2018-06-10 07:02

  本文選題：喉癌 + 癌組織��； 參考：《武漢大學》2016年博士論文

【摘要】：第一部分 組織因子(TF)在喉癌侵襲轉(zhuǎn)移中的相關(guān)性研究目的為了探求組織因子TF和喉癌之間的關(guān)系,我們對喉癌病人的癌組織(carcinomatous tissues, CT)和癌旁組織(pericarcinomatous tissues, PT) TF的表達差異進行了分析研究,并探討了其臨床的潛在意義。方法利用GEO數(shù)據(jù)分析、免疫組化、Western-Blot和real-time RT-PCR共同分析和檢測,TF蛋白在喉癌病人(n=20)的癌旁組織及癌組織中的表達情況。結(jié)果TF蛋白在喉癌病人(n=20)的癌旁組織中高表達,癌組織中低表達或不表達,兩者存在極其顯著的統(tǒng)計學差異(P0.01)。同時,TF的mRNA在癌旁組織中表達量也顯著高于癌組織(P0.01)。GEO數(shù)據(jù)分析TF在腫瘤組織中的表達與遠處正常組織表達水平無差異(P0.05),卻顯著低于腫瘤切緣組織中的表達水平(P0.01)。另外,TF表達水平低的頭頸部鱗癌患者術(shù)后的無病生存時間顯著長于TF表達水平高的患者。結(jié)論TF可能有助于喉癌的癌變,也可以作為判定喉癌惡性程度和進一步發(fā)展的標志物,為人類治療和認知喉癌提供了一條新的思路。第二部分喉癌細胞胞外體誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞表達TF的機制研究目的：探討喉癌細胞胞外體在喉癌轉(zhuǎn)移侵襲中的作用,并進一步闡述胞外體誘導(dǎo)TF表達促進喉癌轉(zhuǎn)移的分子機制。方法：培養(yǎng)人喉癌細胞Hep-2和人血管內(nèi)皮細胞HUVEC,在HUVEC細胞中加入Hep-2細胞胞外體培養(yǎng),檢測TF蛋白及mRNA的改變,同時利用CCK-8增殖實驗、劃痕實驗和transwell遷移實驗檢測胞外體對血管內(nèi)皮細胞增殖和遷移的改變。結(jié)果：HUVEC細胞加入腫瘤胞外體后,TF蛋白及RNA表達水平明顯增高(P0.01),同時HUVEC細胞增殖明顯增強(P0.05),遷移能力亦明顯增加。結(jié)論：喉癌細胞分泌的胞外體可以在體外顯著刺激HUVEC細胞高表達TF,并顯著增強HUVEC細胞的增殖和遷移能力。
[Abstract]:The relationship between tissue Factor TF and Laryngeal carcinoma in invasion and Metastasis objective to explore the relationship between tissue factor TF and laryngeal carcinoma. The difference of expression of CTs and PTTF in patients with laryngeal carcinoma was studied and its clinical significance was discussed. Methods the expression of TF protein in the adjacent tissues and tissues of laryngeal cancer patients was analyzed and detected by using GEO data, immunohistochemical staining and real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Results TF protein was highly expressed in the paracancerous tissues of patients with laryngeal carcinoma, but it was low or not expressed in the carcinoma tissues. There was a significant statistical difference between the two groups (P 0.01). At the same time, the expression of TF mRNA in paracancerous tissues was significantly higher than that in cancer tissues P0.01. GEO data. There was no difference between the expression level of TF mRNA in tumor tissues and that in distant normal tissues. However, the expression level of TF mRNA was significantly lower than that in tumor incised margin tissues (P0.01). In addition, the disease-free survival time of head and neck squamous cell carcinoma with low TF expression was significantly longer than that of high TF expression. Conclusion TF may be helpful to the carcinogenesis of laryngeal carcinoma, and can also be used as a marker for judging the malignant degree and further development of laryngeal carcinoma, which provides a new idea for human treatment and cognition of laryngeal carcinoma. Part two the mechanism of expression of TF in vascular endothelial cells induced by extracellular bodies of laryngeal carcinoma objective: to investigate the role of extracellular bodies in the metastasis and invasion of laryngeal carcinoma and to further elucidate the molecular mechanism of TF expression induced by extracellular bodies in promoting the metastasis of laryngeal carcinoma. Methods: human laryngeal carcinoma cells Hep-2 and human vascular endothelial cells HUVECs were cultured in vitro. The changes of TF protein and mRNA were detected by CCK-8 proliferation assay. The effects of extracellular bodies on proliferation and migration of vascular endothelial cells were detected by scratch test and transwell migration assay. Results the expression levels of TF protein and RNA in human HUVEC cells were significantly higher than those in the tumor extracellular bodies, while the proliferation and migration of HUVEC cells were significantly increased. Conclusion: the extracellular bodies secreted by laryngeal carcinoma cells can significantly stimulate the overexpression of TFVEC cells and enhance the proliferation and migration of HUVEC cells in vitro.
【學位授予單位】：武漢大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R739.65

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本文編號：2002375