本文選題：激活素受體ⅡA + 人晶狀體上皮細胞�。� 參考：《吉林大學》2012年碩士論文

【摘要】：目的: 探討外源表達激活素受體ⅡA（Activin Receptor ⅡA,ActRⅡA）對人晶狀體上皮細胞(Human Lens Epithelial Cell, HLEC)增殖的影響。 方法: (1)將ActRⅡA質粒酶切鑒定后連接到真核表達載體PC-DNA3.0上，共表達一段融合蛋白c-myc，構建重組質粒PC-DNA3.0c-myc-ActRⅡA；LDMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)HLECs，以脂質體介導將重組質粒PC-DNA3.0c-myc-ActRⅡA和空載體質粒PC-DNA3.0分別轉入該細胞，轉染48h后，采用濃度為800ug/ml的G418進行篩選，建立穩(wěn)定表達ActRⅡA的實驗組和對照組細胞系；采用免疫印跡方法檢測目的蛋白ActR ⅡA在HLECs的表達情況； (2)采用四甲基偶氮唑鹽(methyl thiazolyl tetrazolium，，MTT)方法分別檢測實驗組和對照組HLEC的增殖情況，分別在培養(yǎng)24h，48h，72h…10d后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS配）20μl，37℃，5%CO2孵育4h后，用酶標儀在570nm波長處檢測吸光度OD。 結果: 通過免疫印跡法檢測到實驗組較對照組ActRⅡA表達明顯增多，通過MTT法檢測HLEC增殖發(fā)現(xiàn)，實驗組與對照組比較，兩組差異顯著性明顯（P＜0.01），實驗組細胞增殖受到明顯的抑制，并隨時間延長抑制作用逐漸增加。 結論: 外源基因ActRⅡA成功轉染HLEC，構建了穩(wěn)定表達ActRⅡA的HLEC細胞系；外源轉入的激活素受體ⅡA（ActRⅡA）在HLECs內有較高表達；外源表達ActRⅡA對HLEC增殖有抑制作用，且隨時間延長抑制逐漸明顯，從而為基因治療后發(fā)性白內障奠定了一定的理論基礎。
[Abstract]:Objective: To investigate the effect of exogenous expression of activin receptor 鈪

本文編號：1816625