siRNA沉默Survivin基因?qū)Ρ茄拾〤NE-2細胞凋亡的影響
本文選題:鼻咽癌 切入點:RNA干擾 出處:《基因組學與應用生物學》2017年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:合成Survivin小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)序列,用于轉染人鼻咽癌細胞株CNE2,體外觀察Survivin siRNA轉染后CNE-2細胞Survivin mRNA、蛋白的表達、細胞增殖和凋亡情況。設計合成3段特異性Survivin siRNA,用siRNA轉染鼻咽癌CNE-2細胞株,設置空白對照和陰性對照組,通過Real-time PCR檢測CNE-2細胞的Survivin mRNA相對表達量,Western blotting檢測Survivin蛋白的表達,流式細胞術及原位細胞凋亡檢測轉染后細胞凋亡情況。siRNA轉染CNE-2細胞后,siRNA 1組和3組mRNA表達抑制率分別為(68.46±7.94)%、(49.44±3.78)%,siRNA 2組結果無顯著差異(p0.05)。蛋白相對表達量只有siRNA 1組降低,表達抑制率為(30.61±2.47)%,流式細胞術和原位細胞凋亡檢測轉染后CNE-2細胞數(shù)量明顯降低,細胞凋亡比例增高。siRNA干擾沉默Survivin基因能有效抑制CNE-2細胞的增殖和誘導細胞凋亡。本研究為Survivin基因可能作為治療鼻咽癌的一個靶點,為Survivin基因沉默可能是治療鼻咽癌高效的途徑提供體外實驗支持。
[Abstract]:Synthesis of Survivin small interfering RNA (siRNA small interfering RNA) sequence for transfection of human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE2, observe the Survivin siRNA transfected CNE-2 cells after Survivin mRNA, protein expression, cell proliferation and apoptosis. The design and synthesis of 3 specific Survivin siRNA, transfected with siRNA nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2, and blank control the negative control group, detected by CNE-2 cell Real-time PCR Survivin mRNA relative expression, detect the expression of Survivin protein Western blotting, flow cytometry and TUNEL positive cells after transfection the apoptosis of.SiRNA after transfection into CNE-2 cells, the expression of siRNA 1 group and 3 group mRNA inhibition rate were (68.46 + 7.94)%. (49.44 + 3.78)%, the 2 groups showed no significant difference in siRNA (P0.05). The relative expression of siRNA protein only 1 groups decreased, expression inhibition rate was (30.61 + 2.47)%, flow cytometry and in situ fine The number of CNE-2 cells after transfection was detected by cell apoptosis significantly decreased, apoptosis increased ratio of.SiRNA interference silencing Survivin gene can effectively inhibit the proliferation of CNE-2 cells and induce cell apoptosis. In this study, Survivin gene may serve as a target for the treatment of nasopharyngeal carcinoma, Survivin gene silencing may be effective way for the treatment of nasopharyngeal carcinoma in vitro to provide support.
【作者單位】: 海南大學農(nóng)學院;海南省人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗中心海南省細胞與分子遺傳轉化醫(yī)學重點實驗室;
【基金】:海南省自然科學基金項目(20158359)資助
【分類號】:R739.63
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,本文編號:1603739
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