本文選題：TXR1　切入點：鼻咽癌　出處：《中南大學》2012年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的 1.通過研究人類鼻咽癌親本細胞與紫杉醇耐藥細胞中TXR1的表達情況,及TXR1的表達與鼻咽癌紫杉醇耐藥的相關性,探討其與紫杉醇耐藥的關系。 2.篩選高效抑制TXR1基因表達的siRNA,用于鼻咽癌紫杉醇耐藥逆轉(zhuǎn)的研究。 方法 1.從鼻咽癌親本及紫杉醇耐藥細胞中提取RNA及蛋白質(zhì),用熒光定量RT-PCR、Western-blot方法分別在mRNA水平及蛋白水平來檢測鼻咽癌細胞中TXR1的表達情況。 2.通過1ip2000載體將TXR1基因的siRNA導入鼻咽癌耐藥細胞,24小時后提取的蛋白質(zhì),來檢測不同siRNA對TXR1表達的影響。 結果 1.TXR1在鼻咽癌親本細胞、紫杉醇耐藥細胞中均有表達,及耐藥細胞中TXR1的含量比相對應親本細胞中的含量高,且與耐藥指數(shù)呈正相關(P2=0.979)。 2.四條TXR1基因的siRNA (siRNA TXR1-22、TXR1-311、 TXR1-654、Negative control FAM),通過lip2000分別轉(zhuǎn)染鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞HNE-2/Taxol,轉(zhuǎn)染24h后,提取蛋白,利用Western blot技術在蛋白水平檢測不同siRNA對靶基因TXR1表達的影響,結果顯示TXR1-22對靶基因的抑制作用最強。 3. Negative control FAM轉(zhuǎn)染的細胞在倒置熒光顯微鏡下計數(shù),得到較高的轉(zhuǎn)染率(85%),間接說明lip2000轉(zhuǎn)染效率高。 結論 1.TXR1在紫杉醇耐藥細胞中的含量高于鼻咽癌親本細胞,說明TXR1可能與紫杉醇耐藥有關,并為臨床上逆轉(zhuǎn)紫杉醇耐藥奠定了基礎。 2.在蛋白質(zhì)水平,siRNA TXR1-22是所有設計的siRN中對TXR1抑制最強,這為后續(xù)的實驗奠定了基礎。
[Abstract]:Purpose. 1. To investigate the expression of TXR1 in human nasopharyngeal carcinoma (NPC) parental cells and paclitaxel resistant cells, and the relationship between TXR1 expression and paclitaxel resistance. 2. SiRNAs which can inhibit the expression of TXR1 gene in nasopharyngeal carcinoma were screened and used to reverse paclitaxel resistance in nasopharyngeal carcinoma. Method. 1. RNA and protein were extracted from nasopharyngeal carcinoma (NPC) parents and paclitaxel resistant cells. The expression of TXR1 in nasopharyngeal carcinoma cells was detected by RT-PCR Western-blot at mRNA level and protein level, respectively. 2. The siRNA of TXR1 gene was introduced into the drug-resistant nasopharyngeal carcinoma cells 24 hours later by 1ip2000 vector to detect the effect of different siRNA on the expression of TXR1. Results. 1. TXR1 was expressed in the parent cells of nasopharyngeal carcinoma and paclitaxel resistant cells, and the content of TXR1 in the resistant cells was higher than that in the corresponding parent cells, and there was a positive correlation between TXR1 and drug resistance index. 2.The siRNA siRNA TXR1-22nTXR1-311 and TXR1-654Negative control FAMN of four TXR1 genes were transfected into nasopharyngeal carcinoma paclitaxel resistant cell line HNE-2 / Taxol by lip2000 respectively. After 24 hours of transfection, the protein was extracted, and the effect of different siRNA on TXR1 expression of target gene was detected at protein level by Western blot technique. The results showed that TXR1-22 had the strongest inhibitory effect on target gene. 3.The cells transfected with Negative control FAM were counted under inverted fluorescence microscope and the transfection efficiency was 85%, which indirectly indicated that the transfection efficiency of lip2000 was high. Conclusion. 1. The content of TXR1 in paclitaxel resistant cells was higher than that in nasopharyngeal carcinoma parent cells, which suggested that TXR1 might be related to paclitaxel resistance and laid a foundation for clinical reversal of taxol resistance. 2. SiRNA TXR1-22 is the most potent inhibitor of TXR1 among all the designed siRN at protein level, which lays the foundation for further experiments.
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R739.63

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 朱筧青;卵巢癌化療現(xiàn)狀[J];國外醫(yī)學.婦產(chǎn)科學分冊;1997年04期

2 修波,段國升,劉宗惠,薛毅瓏;膠質(zhì)母細胞瘤紫杉醇增敏放射的體外實驗研究[J];中華神經(jīng)外科雜志;1998年05期

3 周曉燕,許良中,朱偉萍,張?zhí)┟?紫杉醇對Raji細胞的作用:G_2/M期阻滯和細胞凋亡[J];中國癌癥雜志;1998年02期

4 陳于法,鄭樹,陳麗榮,李士敏;紫杉醇誘導人乳腺癌細胞凋亡過程DNA甲基化水平檢測[J];腫瘤;1999年02期

5 周運華,柯玉華;紫杉醇聯(lián)合化療轉(zhuǎn)移性乳腺癌15例報告[J];四川腫瘤防治;1999年03期

6 劉少揚,楊嵐,陳惠禎;紫杉醇治療晚期卵巢癌9例分析[J];醫(yī)學新知雜志;1999年04期

7 何瑞,陳佃;樂昌產(chǎn)南方紅豆杉中紫杉醇的含量[J];中藥材;1999年08期

8 盧婷;紫杉醇在非小細胞肺癌患者化療中的應用及護理[J];黑龍江護理雜志;2000年07期

9 林顯敢!510120廣州市,謝德榮!510120廣州市,姚和瑞!510120廣州市,梁新文!510120廣州市,陳岱佳!510120廣州市;國產(chǎn)紫杉醇聯(lián)合順鉑治療晚期肺癌18例療效分析[J];實用醫(yī)學雜志;2000年05期

10 王景江;紫杉醇聯(lián)合順鉑及氟尿嘧啶治療晚期消化道腫瘤[J];中國癌癥雜志;2000年03期

相關會議論文 前10條

1 葉敏;朱珠;傅強;李大魁;;大鼠肝藥酶活性改變對紫杉醇藥物動力學的影響[A];面向21世紀的科技進步與社會經(jīng)濟發(fā)展（下冊）[C];1999年

2 康春生;任玉;原續(xù)波;浦佩玉;周旋;王廣秀;韓磊;賈志凡;;反義微小RNA-21與藥紫杉醇共作用抑制膠質(zhì)瘤的生長[A];2009醫(yī)學前沿論壇暨第十一屆全國腫瘤藥理與化療學術會議論文集[C];2009年

3 李紅杰;王紹霞;樊曉蕾;;紫杉醇過敏反應的急救與護理[A];全國精神科護理學術交流暨專題講座會議論文匯編[C];2004年

4 吳映蓉;張紅銀;;PVC軟輸液袋對紫杉醇穩(wěn)定性影響和其中DEHP溶出量考察[A];2010年中國藥學大會暨第十屆中國藥師周論文集[C];2010年

5 呂妍;岑函婧;覃小玲;畢惠嫦;黃民;陳孝;;紫杉醇聯(lián)合淫羊藿提取物經(jīng)Caco-2細胞轉(zhuǎn)運機制及藥代動力學研究[A];2008第十一次全國臨床藥理學學術大會論文集[C];2008年

6 金晶;鐘國平;潘瑩;劉柏東;畢惠嫦;趙立子;黃民;;LC-MS/MS法測定大鼠血漿中紫杉醇濃度[A];2008第十一次全國臨床藥理學學術大會論文集[C];2008年

7 萬云峰;姚明輝;;紫杉醇誘導腫瘤細胞凋亡的基因表達特性研究[A];第八屆全國生化藥理學術討論會暨第七屆Servier獎頒獎大會會議摘要集[C];2003年

8 賴洵;華映坤;沈曉梅;宋建新;史克倩;聞艷;;紫杉醇聯(lián)合干擾素á-2b對K652細胞的誘導凋亡作用[A];第九屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2003年

9 趙銳;趙瑋瑋;;抗腫瘤植物藥紫杉醇研究進展與動態(tài)[A];第六屆全國藥用植物和植物藥學術研討會論文集[C];2006年

10 毛祺琦;鄭祥毅;楊凱;秦杰;白宇;謝立平;;白藜蘆醇對紫杉醇誘導5637膀胱癌細胞凋亡的影響[A];2009年浙江省男科、泌尿外科學術年會論文匯編[C];2009年

相關重要報紙文章 前10條

1 和龍;“低價紫杉醇”背后的隱患[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2006年

2 ;紫杉醇對人膽管癌RBE細胞凋亡及細胞外信號調(diào)節(jié)激酶表達的影響[N];中國醫(yī)藥報;2003年

3 過國忠;紅豆攻克紫杉醇產(chǎn)業(yè)化難題[N];科技日報;2007年

4 ;市場前景巨大的植物抗癌藥“紫杉醇”[N];云南經(jīng)濟日報;2003年

5 昆侖證券;G 華立——青蒿、紫杉醇、工業(yè)大麻[N];證券日報;2006年

6 徐錚奎;紫杉醇市場饑渴[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2008年

7 記者 張玲娜;紫杉醇命途多舛[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2010年

8 秦峰;四醫(yī)大采用手性催化技術合成紫杉醇[N];中國醫(yī)藥報;2007年

9 黃東臨;紫杉醇原料工藝掣肘待破[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2006年

10 第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院 張中橋;針刺可控紫杉醇不良反應[N];健康報;2007年

相關博士學位論文 前10條

1 丁勇;紫杉醇誘導成骨肉瘤細胞凋亡及Caspase-6基因?qū)Τ晒侨饬黾毎牡蛲稣T導作用[D];第四軍醫(yī)大學;2001年

2 郝星;卵巢癌化療耐藥與紡錘體檢測點功能完整性的相關性研究[D];華中科技大學;2010年

3 武曉靜;MSCs修復血管內(nèi)膜及對平滑肌部分生物學行為的影響[D];第三軍醫(yī)大學;2004年

4 顧海寧;紫杉醇AB環(huán)骨架和喹諾酮等藥物的綠色合成研究[D];浙江大學;2006年

5 王雄文;三苯氧胺聯(lián)合阿霉素、順鉑及紫杉醇抑制MCF-7細胞株增殖的實驗研究[D];中國人民解放軍第一軍醫(yī)大學;2003年

6 耿長新;多烯紫杉醇在體內(nèi)外對人肝細胞肝癌抑制生長及放射增敏實驗研究[D];復旦大學;2003年

7 岳琴;云南紅豆杉枝葉化學成分和紫杉醇半合成及其類似物構效關系的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1995年

8 孟剛;紫杉醇及順鉑誘導MCF-7/ADR和Hela細胞調(diào)亡及其與凋亡相關蛋白和Ca2+的關系[D];安徽醫(yī)科大學;2001年

9 朱曉東;Survivin在紫杉醇抗腫瘤機制中作用及其反義核酸干預胃癌形成的研究[D];復旦大學;2003年

10 曹蘭琴;紫杉醇對人宮頸癌細胞系HCE_1影響的蛋白質(zhì)組學研究[D];中南大學;2007年

相關碩士學位論文 前10條

1 李軍;紫杉醇對自體移植靜脈內(nèi)膜重構作用的研究[D];中國醫(yī)科大學;2002年

2 于亮;TWIST在紫杉醇誘導喉癌Hep-2細胞凋亡中的作用研究[D];山東大學;2010年

3 陳超;G6PD在誘導合成紫杉醇中的作用及其抗氧化機理研究[D];華中科技大學;2004年

4 林青;白術內(nèi)酯Ⅰ對紫杉醇誘導的人卵巢癌細胞存活素survivin表達的拮抗作用及促凋亡作用[D];成都中醫(yī)藥大學;2011年

5 余杰情;TXR1基因在鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞系中的表達[D];中南大學;2012年

6 夏靖燕;紫杉醇聯(lián)合阿霉素、阿糖胞苷對白血病細胞株（K562、HL-60）增殖抑制作用的研究[D];浙江大學;2003年

7 劉蒙蒙;紫杉醇劑量密集方案治療上皮性卵巢癌的meta分析[D];吉林大學;2011年

8 馬雪蓮;COX-2轉(zhuǎn)錄抑制作用逆轉(zhuǎn)MDR1/P-gp介導卵巢癌紫杉醇耐藥的研究[D];廣西醫(yī)科大學;2010年

9 王穌佳;有絲分裂檢查點蛋白BubR1在乳腺癌細胞發(fā)生紫杉醇耐藥中的作用及其機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2011年

10 唐秋;多西紫杉醇對人鼻咽癌細胞系CNE-I的放射增敏作用[D];中國醫(yī)科大學;2002年

，

本文編號：1598552