本文關(guān)鍵詞：p21和p53基因甲基化在喉鱗狀細(xì)胞癌中的差異化表達(dá)及生物學(xué)意義

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【摘要】：目的:研究p21、p53基因甲基化在喉癌組織和喉癌細(xì)胞系Hep-2中的機(jī)制。方法:用甲基化特異性PCR檢測(cè)46例配對(duì)的喉癌組織和癌旁組織中p21、p53基因甲基化情況;用MTT法檢測(cè)去甲基化藥物5-azacytidine及作用時(shí)間對(duì)喉癌細(xì)胞系Hep-2增殖的影響;用TUNEL法檢測(cè)5-azacytidine及作用時(shí)間對(duì)喉癌細(xì)胞系Hep-2凋亡的影響。同時(shí),采用RT-PCR法檢測(cè)干預(yù)前后p21基因mRNA的差異,并采用MSP法檢測(cè)干預(yù)前后p21基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島甲基化狀態(tài)變化。結(jié)果:喉癌組織、癌旁組織中p21基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島甲基化率分別為45.7%和10.9%,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);喉癌組織、癌旁組織中p53基因甲基化率分別為6.5%和4.3%,兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5-azacytidine對(duì)Hep-2細(xì)胞增殖的抑制作用隨著時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增加,呈時(shí)間依賴性;同時(shí),隨著天數(shù)的增加,細(xì)胞凋亡率增加。Hep-2細(xì)胞在5-azacytidine干預(yù)后p21基因被激活,表達(dá)明顯增高。喉癌細(xì)胞系Hep-2中p21基因甲基化程度為43.13%±0.79%,經(jīng)5-azacytidine干預(yù)后,甲基化程度明顯下降,甚至表現(xiàn)為無甲基化。結(jié)論:喉癌組織和喉癌細(xì)胞系Hep-2中存在p21基因高甲基化,是喉癌區(qū)別于正常組織的分子事件。p53基因在喉癌組織和喉癌細(xì)胞系Hep-2中低甲基化,其基因的失活可能通過基因突變等其他形式來發(fā)生。去甲基化藥物5-azacytidine可以通過誘導(dǎo)p21基因啟動(dòng)子CpG島去甲基化修飾,改變腫瘤細(xì)胞細(xì)胞周期基因的調(diào)控,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)上海一院臨床醫(yī)學(xué)院耳鼻咽喉頭頸外科;復(fù)旦大學(xué)附屬浦東醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;
【分類號(hào)】：R739.65
【正文快照】： cancer and laryngeal cancer cell line Hep-2,which was a molecular event distinguished laryngeal cancer from nor-mal laryngeal tissue.There was p53gene promoter CpG island hypomethylation in laryngeal cancer and laryngealcancer cell line Hep-2.Inactivatio

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