本文關鍵詞：siRNA沉默Gankyrin基因對喉鱗癌Hep-2細胞生物學行為的影響

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【摘要】：目的 :觀察小干擾RNA(small interference RNA,si RNA)沉默Gankyrin基因對喉鱗癌Hep-2細胞的生物學行為影響。方法:用si RNA沉默喉鱗癌Hep-2細胞中的Gankyrin基因,運用實時定量反轉錄聚合酶鏈反應(q RT-PCR)及蛋白印跡法(Western blot)技術檢測轉染前后Gankyrin m RNA及蛋白的表達。采用CCK-8法檢測細胞增殖能力,流式細胞儀檢測細胞凋亡及細胞周期,細胞劃痕損傷實驗和Transwell小室實驗檢測細胞遷移能力,Matrigel侵襲實驗檢測細胞侵襲能力,Western blot檢測Gankyrin下調后p53蛋白的表達。結果:q RT-PCR和Western blot結果顯示,Gankyrin si RNA組Gankyrin m RNA和蛋白的相對表達量均低于對照si RNA組和未處理組(P0.001)。CCK-8法顯示Gankyrin si RNA組細胞增殖速度明顯下降(P0.001)。流式細胞儀檢測結果表明,Gankyrin si RNA組細胞凋亡率[(7.70±1.12)%]明顯高于對照si RNA組[(2.34±0.32)%]和未處理組[(1.82±0.29)%],差異有統(tǒng)計學意義(P0.001);與兩對照組相比,Gankyrin si RNA組G1期比例增加,S期比例減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.001)。細胞劃痕損傷實驗和Transwell小室實驗顯示Gankyrin si RNA組的細胞遷移能力明顯減弱(P0.01);Matrigel侵襲實驗顯示Gankyrin si RNA組細胞侵襲能力與對照si RNA組和未處理組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。Gankyrin表達下調增加了Hep-2細胞中p53蛋白的表達,差異有統(tǒng)計學意義(P0.001)。結論:Gankyrin表達下調能抑制Hep-2細胞的增殖和遷移,可能與細胞凋亡、細胞周期改變及p53的表達密切相關。
【作者單位】： 徐州醫(yī)學院研究生學院;徐州醫(yī)學院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;南京醫(yī)科大學附屬江蘇省腫瘤醫(yī)院頭頸外科;
【關鍵詞】： 喉腫瘤 細胞增殖 細胞周期 細胞凋亡 Gankyrin
【基金】：江蘇省自然科學基金(BK20151561)
【分類號】：R739.65
【正文快照】： 南京醫(yī)科大學學報Gankyrin是近年新發(fā)現(xiàn)的癌基因。2000年,日本學者Higashitsuji等[1]在人肝癌組織c DNA文庫中發(fā)現(xiàn)了Gankyrin基因,通過對比肝癌組織與正常組織,首次提出Gankyrin m RNA在肝癌組織中高表達。研究發(fā)現(xiàn),Gankyrin可通過多種信號通路影響肝癌細胞的生物學行為,對腫

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