本文關(guān)鍵詞：IL-22對肝損傷小鼠部分肝切除后肝再生的作用

  更多相關(guān)文章： 小鼠 肝再生動物模型 肝 70%切除術(shù) 白細胞介素-22 刀豆蛋白 A

【摘要】：肝臟疾病多種多樣,包括各種原因?qū)е碌牟《拘曰蚓凭愿窝�、肝臟纖維化和肝細胞癌,嚴重威脅到人類的健康。白細胞介素-22(interleukin-22,IL-22)因子是一種近年來新研究發(fā)現(xiàn)的CD4+Th細胞因子的一種,參與機體免疫系統(tǒng)的多種病理反應,能夠促進組織的快速修復和促進炎癥反應的雙重功效。然而對于其具體作用的分子生物學機制我們尚不十分明確。目前對白細胞介素-22的作用機理研究尚處于初始階段,白細胞介素-22與其他細胞因子的相關(guān)性及具體作用,仍需我們應用相關(guān)科學技術(shù)及實驗研究進行更深的探索。近年來對白細胞介素-22的探索也取得了一定的成效,為其在肝臟疾病中肝損傷修復和促進肝再生的作用機制研究奠定了基礎(chǔ)。第一部分小鼠70%肝切除模型的改良研究目的建立一種高效、簡易的小鼠70%肝臟切除模型,為研究肝臟損傷修復和再生的機制研究提供新的模型平臺。方法8-12周的C57BL/6雄性小鼠(20-25g)150只,隨機分成兩組:經(jīng)典組(保留入肝血流組)和改良組(阻斷入肝血流組)。分別采用兩種建模方法建立小鼠70%肝臟切除模型。比較術(shù)后小鼠的生存率和肝再生情況。結(jié)果存活率改良組(97.3%)顯著高于經(jīng)典組(86.7%),其中術(shù)后膽漏、出血和腔靜脈狹窄的發(fā)生率,改良法顯著低于經(jīng)典法;而兩組肝切除術(shù)后肝臟再生情況無顯著差異。結(jié)論通過結(jié)扎血管阻斷入肝血流、結(jié)扎膽道阻斷入肝血流,然后行70%肝葉切除法建立的小鼠肝切除模型,簡便易行,并發(fā)癥少,成功率高,為肝再生的細胞分子生物學機制研究提供了理想的肝切除模型。第二部分外源性的白細胞介素-22對刀豆蛋白A介導的肝損傷小鼠部分肝切除后肝再生的作用研究目的探討刀豆蛋白A介導的肝損傷小鼠行部分肝切除術(shù)后白細胞介素-22對其肝臟再生的治療作用及機制研究。方法100只C57BL/6小鼠,隨機分成PH組(單一70%肝切除組)、ConA組(單一刀豆蛋白A損傷組)、ConA+PH組(刀豆蛋白A損傷后行70%肝切除組)和ConA+IL-22+PH組(刀豆蛋白A損傷后經(jīng)白細胞介素-22干預再行70%肝切除組),然后每組分別于術(shù)后32h、40h、48h、1w、2w各處死5只,取其血清和肝臟組織。稱肝葉重量計算肝再生率,生化檢測不同時間點肝功能(丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、白蛋白(ALB))的變化,做病理切片觀察各時間點的病理損傷,免疫組化法檢測不同時間點肝臟組織中增殖細胞核抗原(PCNA)的含量,計算PCNA指數(shù),Western Blot檢測細胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、信號傳導與轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)水平了解細胞周期改變情況,實時熒光定量聚合酶鏈反應(RQ-PCR)檢測不同時間點甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)的表達。采用獨立樣本t檢驗和線性相關(guān)分析比較各組的變化。結(jié)果經(jīng)白細胞介素-22處理后,小鼠肝再生顯著,術(shù)后各時間點(40h、48h、1w、2w),ConA+PH+IL-22干預組小鼠肝質(zhì)量/體質(zhì)量(3.16±0.17,3.34±0.13,4.19±0.14,5.14±0.16)明顯高于ConA+PH組(2.95±0.14、3.09±0.14、3.78±0.10、4.89±0.12),顯著減輕ConA對肝組織的損傷,且在術(shù)后各時間點ConA+PH損傷組再生肝組織內(nèi)STAT3蛋白和Cyclin D1蛋白表達量以及AFPmRNA基因的水平明顯低于其余組,經(jīng)白細胞介素-22預處理后再生肝組織內(nèi)STAT3蛋白和Cyclin D1蛋白表達量及AFPmRNA基因的水平顯著高于其余組。結(jié)論白細胞介素-22在刀豆蛋白A介導的肝損傷小鼠部分肝切除術(shù)后再生過程中有明顯的促進作用,該作用可能是白細胞介素-22通過與受體結(jié)合后激活STAT3介導的信號通路,從而活化細胞周期蛋白D1(Cyclin D1)以及AFPmRNA基因的表達,促進肝細胞增殖再生,修復肝損傷。
【關(guān)鍵詞】：小鼠 肝再生動物模型 肝 70%切除術(shù) 白細胞介素-22 刀豆蛋白 A
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R657.3
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語/符號說明11-13
• 前言13-16
• 研究現(xiàn)狀、成果13-14
• 研究目的、方法14-16
• 一、小鼠 70％肝切除模型的改良16-30
• 對象和方法16-21
• 1.1 主要材料、試劑與儀器設(shè)備16-17
• 1.1.1 主要試劑16
• 1.1.2 主要儀器16-17
• 1.2 實驗方法17-21
• 1.2.1 實驗動物和分組17
• 1.2.2 小鼠肝切除模型的建立17-18
• 1.2.3 觀察術(shù)后小鼠的生存狀況18-19
• 1.2.4 術(shù)后小鼠肝/體重比的測定19
• 1.2.5 術(shù)后小鼠PCNA表達水平的測定19-20
• 1.2.6 統(tǒng)計方法20-21
• 結(jié)果21-24
• 2.1 兩種方法的存活率及死亡原因比較21
• 2.2 肝再生恢復情況比較21-22
• 2.3 PCNA表達水平比較22-24
• 討論24-29
• 小結(jié)29-30
• 二、外源性的白細胞介素-22對刀豆蛋白A介導的肝損傷小鼠部分肝切除后肝再生的作用30-47
• 對象和方法30-38
• 1.1 主要材料、試劑與儀器設(shè)備30-32
• 1.1.1 主要試劑30-31
• 1.1.2 主要儀器31-32
• 1.2 實驗方法32-37
• 1.2.1 實驗動物和分組32
• 1.2.2 小鼠肝再生模型的建立32-33
• 1.2.3 標本收集33-34
• 1.2.4 術(shù)后小鼠肝/體重比的測定34
• 1.2.5 術(shù)后小鼠血清生化分析34
• 1.2.6 術(shù)后小鼠肝臟組織標本石蠟切片及HE染色34
• 1.2.7 術(shù)后小鼠肝臟組織切片增值變化34
• 1.2.8 術(shù)后小鼠肝臟組織AFPm RNA變化34-36
• 1.2.9 術(shù)后小鼠Cyclin D1、STAT3蛋白的表達變化36-37
• 1.3 統(tǒng)計方法37-38
• 結(jié)果38-43
• 2.1 術(shù)后小鼠肝/體重質(zhì)量比的變化38
• 2.2 術(shù)后小鼠血清中ALT、AST水平變化38-39
• 2.3 小鼠肝臟組織HE染色結(jié)果39-40
• 2.4 小鼠肝臟組織細胞增殖變化40-41
• 2.5 小鼠肝臟組織細胞AFPm RNA基因的表達變化41-42
• 2.6 術(shù)后小鼠CyclinD1、STAT3蛋白的表達變化42-43
• 討論43-47
• 結(jié)論47-48
• 參考文獻48-55
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明55-57
• 綜述 白細胞介素-22 與肝臟疾病關(guān)系的研究進展57-64
• 綜述參考文獻61-64
• 致謝64-65
• 個人簡歷65

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 Rita Patry-lahey ,趙金祥;如何幫助喉頭切除術(shù)病人在家中進行自我護理[J];國外醫(yī)學.護理學分冊;1986年03期

2 沈洋;;在20歲以前值得做鐙骨切除術(shù)嗎?[J];國外醫(yī)學.耳鼻咽喉科學分冊;1988年04期

3 徐波,朱光輝,古立誠;24例胃大部切除術(shù)中損傷鄰近器官的原因及對策[J];廣州醫(yī)學院學報;2001年03期

4 李剛,蘇榮祥;巨大牙骨質(zhì)-骨化纖維瘤切除術(shù)的全麻處理[J];口腔醫(yī)學縱橫;2002年02期

5 宋玉琴;胃大部切除術(shù)患者的護理[J];中國煤炭工業(yè)醫(yī)學雜志;2002年11期

6 高嵐;喉聲門上水平部分切除術(shù)41例分析[J];吉林大學學報(醫(yī)學版);2003年04期

7 李冠華;胃大部切除術(shù)胃回腸錯吻一例報道[J];腹部外科;2003年06期

8 ;腹腔鏡右后肝二段切除術(shù)(Ⅶ～Ⅷ段)[J];生物醫(yī)學工程與臨床;2003年02期

9 王宗銀;試論胃大部切除術(shù)前準備及術(shù)后處理[J];職業(yè)衛(wèi)生與病傷;2003年01期

10 馬強;胃大部切除術(shù)胃回腸錯吻1例[J];華西醫(yī)學;2005年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王松;;眉切除術(shù)的臨床體會[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學會醫(yī)學美容專業(yè)委員會首屆學術(shù)交流大會論文匯編[C];2004年

2 洪德飛;;腹腔鏡胰腺節(jié)段切除術(shù)[A];2012浙江省微創(chuàng)外科年會論文集[C];2012年

3 牟一平;嚴加費;周偉;許斌;陳其龍;王觀宇;;腹腔鏡胰腺中段切除術(shù):從小切口走向內(nèi)在微創(chuàng)[A];2012浙江省微創(chuàng)外科年會論文集[C];2012年

4 孟鑌;馮地忠;盧海;;206例胃大部切除術(shù)的臨床解剖學分析[A];“2008災害創(chuàng)傷與急救新進展”學術(shù)交流會學術(shù)論文集[C];2008年

5 劉春曉;徐啊白;鄭少波;李虎林;徐亞文;方平;陳玢\~;;腹膜外徑路腹腔鏡前列腺癌根治性切除術(shù)(附50例報告)[A];第十五屆全國泌尿外科學術(shù)會議論文集[C];2008年

6 楊紅芳;;50例腔鏡下甲狀腺腫瘤切除術(shù)的護理體會[A];創(chuàng)建患者安全文化——中華護理學會第15屆全國手術(shù)室護理學術(shù)交流會議論文匯編（下冊）[C];2011年

7 余盛盅;;CO_2激光在舌癌治療的應用[A];海峽兩岸2008口腔癌診治與修復重建新進展研討會論文集[C];2008年

8 李忠芳;;脫垂子宮陰式全切除術(shù)病人的護理[A];全國婦產(chǎn)科護理學術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2003年

9 任柏勇;黃自生;趙金斌;雷新民;萬玉峰;嚴詩偉;;膽囊部分切除術(shù)26例臨床分析[A];第二十二屆航天醫(yī)學年會暨第五屆航天護理年會論文匯編（上冊）[C];2006年

10 王東文;曹曉明;梁學志;劉春;王靖宇;張旭輝;王t熺，

本文編號：795462