發(fā)布時間：2017-09-02 15:21

  本文關(guān)鍵詞：骨關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞研究

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【摘要】：研究背景：骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis, OA)是最常見的關(guān)節(jié)疾病之一,它的顯著病理特征是進(jìn)展性的關(guān)節(jié)軟骨破壞,從而導(dǎo)致關(guān)節(jié)疼痛和活動受限,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)是來源于間質(zhì)組織，具有增值和多向分化能力的細(xì)胞,廣泛參與體內(nèi)損傷修復(fù)過程。既往有研究發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)液中含有間充質(zhì)干細(xì)胞,而且早期骨關(guān)節(jié)炎比正常人的關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞數(shù)量會有所增加。這一發(fā)現(xiàn)對于研究骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制及治療方法有著重要的意義,但是這些研究也存在一定的局限性,例如他們使用的檢測方法還不夠敏感和精確。因此,我們希望通過本研究來分離培養(yǎng)和鑒定人關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞,基于Flowsight(?)圖像流式細(xì)胞技術(shù),比較早期和晚期骨關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞比例的差異。方法：(1)取人關(guān)節(jié)液后,采用貼壁法進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),鏡下觀察關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)。5%C02、37℃恒溫箱中培養(yǎng)28天,至細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)瓶底后,使用PE-CD44、FITC-CD90、APC-CD73、PerCP-Cy5.5-CD105、eFluor450-CD34、APC-eFluor 780-CD45這6種熒光抗體標(biāo)記細(xì)胞,應(yīng)用FlowSight(?)流式細(xì)胞儀鑒定關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞,并觀察其單細(xì)胞形態(tài)和熒光染色情況。(2)根據(jù)患者術(shù)前下肢全長和膝關(guān)節(jié)側(cè)位X線片,依據(jù)骨關(guān)節(jié)炎的Kellgren與Lawrence (K-L)影像學(xué)分期方法,將患者分為早期OA組(17例)和晚期OA組(26例)。取患者的關(guān)節(jié)液后,一半關(guān)節(jié)液不經(jīng)過培養(yǎng),直接使用圖像流式細(xì)胞技術(shù)檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的比例；另一半關(guān)節(jié)液進(jìn)行分離培養(yǎng),28天后檢測關(guān)節(jié)液中間充質(zhì)干細(xì)胞的比例,評估關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞比例與膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎影像學(xué)分期及其他因素的相關(guān)性。結(jié)果：關(guān)節(jié)液中的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)后,顯微鏡下可見細(xì)胞呈紡錘形,有集落形成,符合間充質(zhì)干細(xì)胞的外觀特征。圖像流式細(xì)胞儀中可見分離出的間充質(zhì)干細(xì)胞的單細(xì)胞圖像和熒光染色照片,關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞在表面標(biāo)志物中表達(dá)CD44、CD90、CD73、CD105,不表達(dá)CD34和CD45。新鮮的關(guān)節(jié)液中,晚期OA組SF-MSCs占總細(xì)胞的比例高于早期OA組(2.05±0.64 vs3.18%±0.92，P0.01)。細(xì)胞培養(yǎng)后,兩組SF-MSCs的比例仍有差異(47.15%±14.36 vs 57.64±10.84,P0.01)。SF-MSC比例與年齡、BMI、HSS評分等因素?zé)o相關(guān)性。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了關(guān)節(jié)液中存在間充質(zhì)干細(xì)胞,且首次運(yùn)用多通道圖像流式細(xì)胞技術(shù),更加直觀、準(zhǔn)確地鑒定了間充質(zhì)干細(xì)胞。骨關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞比例與骨關(guān)節(jié)炎進(jìn)展程度具有相關(guān)性,原因可能是軟骨自身修復(fù)和愈合的反應(yīng)在晚期骨關(guān)節(jié)炎中更為活躍。
【關(guān)鍵詞】：關(guān)節(jié)液 間充質(zhì)干細(xì)胞 圖像流式細(xì)胞技術(shù) 骨關(guān)節(jié)炎 影像學(xué)分期
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R684.3
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 第一部分 人關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和鑒定11-21
• 材料和方法11-14
• 結(jié)果14-20
• 討論20-21
• 第二部分 關(guān)節(jié)液間充質(zhì)干細(xì)胞與骨關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性研究21-28
• 材料和方法21-24
• 結(jié)果24-26
• 討論26-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 文獻(xiàn)綜述32-40
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 縮略詞對照表40-41
• 發(fā)表文章41-42
• 致謝42

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3 史春夢;;間充質(zhì)干細(xì)胞表述中需要注意的幾個問題[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2009年14期

4 瞿海龍;邊劍飛;張冰;王穎;周英蓮;;間充質(zhì)干細(xì)胞臨床應(yīng)用的前景與困惑[J];醫(yī)學(xué)研究與教育;2011年05期

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7 吳實(shí);鄧列華;;皮膚間充質(zhì)干細(xì)胞在促進(jìn)皮膚愈合中的作用[J];實(shí)用皮膚病學(xué)雜志;2013年03期

8 吳清法,王立生,吳祖澤;間充質(zhì)干細(xì)胞的來源及臨床應(yīng)用[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2002年03期

9 黃定強(qiáng);間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(耳鼻咽喉科學(xué)分冊);2003年03期

10 付文玉,路艷蒙,喬東訪,樸英杰;運(yùn)用組織工程學(xué)原理構(gòu)建間充質(zhì)干細(xì)胞的三維培養(yǎng)體系[J];濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2003年03期

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1 陳可;王丁;韓之波;朱德林;韓忠朝;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外發(fā)揮免疫活性的研究[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會議論文摘要[C];2009年

2 金明順;張毅;賈秀芬;周燕華;閆妍;劉慧雯;;小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)以及多潛能分化的研究[A];中國解剖學(xué)會第十一屆全國組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2009年

3 李爭艷;劉楊;翟麗麗;楊迷玲;王立峰;;間充質(zhì)干細(xì)胞在腫瘤發(fā)展過程中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2009年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

4 張彥;李尚珠;;間充質(zhì)干細(xì)胞在血管工程中的機(jī)制及應(yīng)用[A];2009全國中西醫(yī)結(jié)合周圍血管疾病學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2009年

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6 黎嬌;朱爭艷;杜智;駱瑩;王鵬;高英堂;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分泌物對肝細(xì)胞增殖和凋亡的影響[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第30次學(xué)術(shù)年會暨生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會論文集[C];2010年

7 譚遠(yuǎn)超;Kevin;姜紅江;黃相杰;周紀(jì)平;;間充質(zhì)干細(xì)胞在骨傷疾病治療中的應(yīng)用[A];首屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨科微創(chuàng)學(xué)術(shù)交流會暨專業(yè)委員會成立大會論文匯編[C];2011年

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9 戴育成;;間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性和應(yīng)用[A];2005年華東六省一市血液病學(xué)學(xué)術(shù)會議暨浙江省血液病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2005年

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1 滿學(xué)杰;天津?yàn)I海新區(qū)建最大間充質(zhì)干細(xì)胞生產(chǎn)基地[N];新華每日電訊;2008年

2 滿學(xué)杰;津昂賽打造間充質(zhì)干細(xì)胞生產(chǎn)基地[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2008年

3 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院輸血科 李忠俊 整理 吳劉佳;間充質(zhì)干細(xì)胞研究又見新方法[N];健康報;2013年

4 上海生科院 上海交大醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所 曹楷;間充質(zhì)干細(xì)胞：干細(xì)胞中的孫悟空[N];上�？萍紙�;2014年

5 記者　陳建強(qiáng);首家間充質(zhì)干細(xì)胞庫在津建成[N];光明日報;2006年

6 記者　馮國梧;細(xì)胞產(chǎn)品國家工程中心建設(shè)方案獲準(zhǔn)[N];科技日報;2007年

7 實(shí)習(xí)生 劉霞;間充質(zhì)干細(xì)胞有望用于面部整形[N];科技日報;2007年

8 本報記者 王新佳;我國“原始間充質(zhì)干細(xì)胞”注射液進(jìn)入臨床研究[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2005年

9 馮國梧;全球首個臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫規(guī)模化運(yùn)營[N];科技日報;2008年

10 劉瑩清;全球首個臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫泰達(dá)規(guī)模運(yùn)營[N];北方經(jīng)濟(jì)時報;2008年

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1 王皓;五指山小型豬OCT-4、SOX-2基因在骨髓間充質(zhì)與臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞中的過表達(dá)研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

2 孔德曉;間充質(zhì)干細(xì)胞及胰島素分泌細(xì)胞治療糖尿病的臨床及應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D];山東大學(xué);2015年

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本文編號：779340