本文關(guān)鍵詞：脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞對皮膚移植成活過程的影響

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【摘要】：目的本文旨在從促進(jìn)血管化、抑制炎癥及促進(jìn)膠原形成等方面分析探討脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adipose-derived stem cells, ASCs)對皮膚移植成活過程的影響。方法取30只SD大鼠,隨機(jī)分為實驗組ASC組及對照組PBS組,每組各15只大鼠。于背部中央各取3cm×3cm全層皮膚及其肉膜組織,ASCs經(jīng)過分離、提取及鑒定后分別注射于ASC組大鼠背部筋膜層,對照組對應(yīng)注射PBS后,將游離皮片回植,打包加壓固定。分別與第1、2、3、7及14天通過激光多普勒儀進(jìn)行評估皮膚成活情況及血流灌注情況,并取材行相關(guān)組織學(xué)及分子生物學(xué)檢查。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)免疫組織化學(xué)檢測皮片血管生成情況;同時對14天的組織行血管性血友病因子(von Willebrand Factor, vWF)免疫熒光檢測，進(jìn)一步了解CM-Dil標(biāo)記的ASCs的轉(zhuǎn)歸。馬松及天狼猩紅染色觀察膠原形成情況,免疫組織化學(xué)染色抑制瘢痕形成因子轉(zhuǎn)化生長因子β3 (transforming growth factorβ3, TGF-β3)的表達(dá)。通過實時定量PCR檢測炎癥相關(guān)的細(xì)胞因子的表達(dá),并通過免疫熒光以及western blot檢測巨噬細(xì)胞亞型的分布。結(jié)果ASC組皮膚移植后血流灌注明顯高于對照組,14天后,ASCs組新血管形成,膠原沉積,膠原蛋白I型與III型比和VEGF水平和TGFβ3表達(dá)高于PBS組。此外,ASC組促進(jìn)炎癥因子IL-1β和TNF-a表達(dá)顯著減少,而抗炎因子IL-10的水平和M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物Arg-1等表達(dá)增加。結(jié)論ASCs通過促進(jìn)促進(jìn)血管化、抑制炎癥及促進(jìn)膠原沉積，，可以有效增加皮膚移植后血流灌注,促進(jìn)血運(yùn)建立,改善皮移植的成活。另外,本研究探索了ASCs的抗炎效應(yīng),并了解到ASCs通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的表型,增加M2型巨噬細(xì)胞的表達(dá)來實現(xiàn)其抗炎作用,從而間接促進(jìn)了皮膚移植的成活。
【關(guān)鍵詞】：脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 皮膚移植 血管化 抑制炎癥 巨噬細(xì)胞 膠原沉積
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R622.1
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 第一部分 ASCs的分離提取與鑒定11-20
• 實驗材料11-13
• 實驗方法13-16
• 實驗結(jié)果16-19
• 討論19-20
• 第二部分 ASCs對大鼠皮片移植成活過程的影響20-43
• 實驗材料20-22
• 實驗方法22-33
• 實驗結(jié)果33-41
• 討論41-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 文獻(xiàn)綜述48-58
• 參考文獻(xiàn)53-58
• 個人簡歷58
• 碩士期間發(fā)表文章58-59
• 致謝59

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