本文關(guān)鍵詞：大鼠脊髓損傷后β淀粉樣蛋白的表達變化及作用機制研究

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【摘要】：目的：觀察大鼠脊髓損傷后β淀粉樣蛋白(Aβ)的表達變化,并應(yīng)用Y分泌酶抑制劑DAPT降低Aβ蛋白表達,觀察其對大鼠功能恢復(fù)、神經(jīng)元存活和小膠質(zhì)細胞活化的影響,探討Aβ蛋白在大鼠脊髓損傷中的作用機制。方法：實驗一采用SD大鼠128只,隨機分為輕度損傷組(SCI-M組)、中度損傷組(SCI-Mo組)、重度損傷組(SCI-S組)和假手術(shù)組(Sham組),每組各32只。按照Allen's打擊法進行T8節(jié)段脊髓打擊損傷,分別采用(1)BBB評分評估大鼠運動功能;(2)HE染色觀察脊髓損傷區(qū)形態(tài)學(xué)改變；(3)酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測大鼠血液及腦脊液中Ap蛋白濃度水平;(4)免疫印跡法(Western blot)檢測大鼠脊髓組織中APP、Aβ表達變化;(5)對大鼠血清和腦脊液中Aβ蛋白水平與BBB評分做Pearson相關(guān)性分析;實驗二采用SD大鼠96只,隨機分為脊髓損傷組(SCI)、治療組(DAPT)、假手術(shù)組(Sham),每組各32只。分別采用(1)BBB評分評估大鼠運動功能恢復(fù)情況;(2)HE染色觀察脊髓損傷區(qū)形態(tài)學(xué)變化;(3)尼氏染色觀察脊髓前角運動神經(jīng)元形態(tài)及神經(jīng)元細胞計數(shù)；(4)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清和腦脊液中Aβ蛋白濃度水平,以及血清中IL-1β、IL-6、TNF-α等炎癥因子水平;(5)免疫印跡法(Western blot)檢測脊髓組織中APP和Ap表達變化;(6)免疫熒光試驗觀察脊髓中Aβ、Iba-1等陽性細胞及共染情況。結(jié)果：實驗一(1)大鼠SCI術(shù)后BBB評分下降：(2)大鼠SCI后12h血液及腦脊液中Ap蛋白水平開始升高,至損傷后3d升至高峰(P0.05),各損傷組蛋白水平升高幅度隨損傷程度加重而增高,損傷后28d SCI-S組仍高于Sham組水平(P0.05)：(3)SCI后1d和3d大鼠脊髓組織中Ap蛋白表達明顯增高(P0.05),各損傷組脊髓組織Aβ蛋白表達水平隨損傷嚴重程度加重而增加；(4)SCI后3d大鼠血清和腦脊液Ap蛋白水平與損傷后28d運動功能BBB評分均呈負相關(guān)(P0.01)。實驗二(1)DAPT組大鼠運動功能評分自SCI后14d始明顯高于SCI組(P0.05);(2)HE染色發(fā)現(xiàn)SCI后3d和14d DAPT組大鼠脊髓背側(cè)白質(zhì)和灰質(zhì)區(qū)壞死程度明顯輕于SCI組;(3)尼氏染色發(fā)現(xiàn)SCI后3d和14d DAPT組大鼠脊髓前角運動神經(jīng)元計數(shù)明顯高于SCI組(P0.05);(4)ELISA去檢測發(fā)現(xiàn)SCI后12h DAPT組大鼠血清和腦脊液中Aβ蛋白水平明顯低于SCI組(P0.05)：(5)Western blot檢測發(fā)現(xiàn)SCI后3d DAPT組和SCI組大鼠脊髓組織APP蛋白表達較Sham組均明顯增高(P0.05)，DAPT組Aβ蛋白表達較SC1組明顯降低(P0.05)：(6)免疫熒光實驗發(fā)現(xiàn)DAPT組大鼠脊髓前角運動神經(jīng)元區(qū)Aβ和Ibα-1陽性細胞數(shù)明顯低于SCI組(P0.05),免疫熒光共染發(fā)現(xiàn)DAPT組大鼠脊髓前角運動神經(jīng)元區(qū)NeuN性神經(jīng)元細胞中Aβ表達較SCI組明顯減少(P0.05)：(7)損傷后3d DAPT組大鼠血清IL-1、IL-6、TNF-a水平較SCI組明顯降低(P0.05)。結(jié)論：(1)大鼠SCI后早期Aβ蛋白表達升高,其升高水平呈現(xiàn)時間依賴性,且Aβ蛋白升高水平隨SCI嚴重程度加重而增高。(2)大鼠SCI后血清和腦脊液中Aβ蛋白水平越高,運動功能恢復(fù)越差,監(jiān)測血清和腦脊液中Aβ蛋白水平對于脊髓損傷的評估可能具有一定的參考價值。(3)大鼠SCI后脊髓中APP、Aβ蛋白表達增多,導(dǎo)致神經(jīng)元細胞中Aβ蛋白沉積,能夠引起小膠質(zhì)細胞活動、釋放炎癥因子,導(dǎo)致神經(jīng)元的死亡。(4)應(yīng)用DAPT能夠有效降低大鼠SCI后Aβ蛋白表達水平,促進運動功能恢復(fù)。其機制可能是通過減少急性期小膠質(zhì)細胞激活,減輕局部炎癥反應(yīng)程度,從而改善了神經(jīng)元的存活環(huán)境,促進了運動功能的恢復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：脊髓損傷 β淀粉樣蛋白 小膠質(zhì)細胞 大鼠
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R651.2
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 第一部分 大鼠脊髓損傷后β淀粉樣蛋白表達變化的實驗研究13-28
• 材料與方法13-19
• 結(jié)果19-25
• 討論25-27
• 結(jié)論27-28
• 第二部分 抑制β淀粉樣蛋白生成對大鼠脊髓損傷后運動功能恢復(fù)的影響和作用機制研究28-48
• 材料與方法28-31
• 結(jié)果31-44
• 討論44-47
• 結(jié)論47-48
• 參考文獻48-53
• 總結(jié)53-54
• 文獻綜述54-69
• 參考文獻60-69
• 附錄69-70
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況70-71
• 致謝71

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1 陳同度,張昌穎;素食大鼠的貧血現(xiàn)象[J];營養(yǎng)學(xué)報;1957年04期

2 陳偉強;趙善廣;;自制注射用大鼠固定裝置[J];上海實驗動物科學(xué);1992年04期

3 肖柳英,林培英,馮昭明,張丹;不同周齡的SD大鼠生理、生化及體重的正常值測定[J];中藥新藥與臨床藥理;1996年03期

4 李淑云;簡易大鼠灌胃器的制作[J];錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2001年04期

5 楊明智,陳積圣;一種大鼠抓取與固定的新工具介紹[J];上海實驗動物科學(xué);2001年03期

6 戴英,陸群;復(fù)方H_(505)對Wistar大鼠外周血的血液流變學(xué)指標的影響[J];中國血液流變學(xué)雜志;2001年01期

7 韋應(yīng)波,孫喜慶,曹新生,姚永杰,馮岱雅,楊長斌;+Gz暴露時間對大鼠記憶功能和行為的影響[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2003年01期

8 呂學(xué)軍,郭俊生,李敏,周利梅,張永娟;暈船大鼠體內(nèi)鐵含量的變化[J];中國職業(yè)醫(yī)學(xué);2003年04期

9 湯仁仙,王迎偉,王慧,周峰;201A中藥合劑對大鼠抗腎小球基底膜腎炎病變的影響[J];徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2003年06期

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2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;，

本文編號：683019