本文關鍵詞：硫酸軟骨素酶ABC及Nogo-66受體拮抗劑聯(lián)合鼠胚神經(jīng)干細胞移植對大鼠脊髓損傷的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究硫酸軟骨素酶ABC(chondroitinase ABC,Ch ABC)、Nogo-66受體拮抗劑[Nogo-66(1-40)antagonist peptide,NEP1-40]及鼠胚神經(jīng)干細胞(neural stem cells,NSCs)聯(lián)合移植對大鼠損傷脊髓功能恢復的影響。方法:體外應用全反式維甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)(濃度1.0μmol/L)誘導NSCs(前期實驗分離、培養(yǎng)并凍存的鼠胚NSCs),誘導后鑒定NSCs特異性標志物,移植前通過5-溴脫氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2-deoxy Uridine,Brdu)標記NSCs。將60只SD大鼠隨機分為假手術組(A組,n=10)、損傷對照組(B組,n=10)、NSCs治療組(C組,n=10)、NSCs聯(lián)合Ch ABC治療組(D組,n=10)、NSCs聯(lián)合NEP1-40治療組(E組,n=10)、NSCs聯(lián)合Ch ABC和NEP1-40治療組(F組,n=10)。移植前分別對B、C、D、E及F組的大鼠制作胸段脊髓全橫斷損傷模型。術后3d,E和F組經(jīng)留置的導管注入NEP1-40 20μl/d,連續(xù)28d;術后8d,C、D、E及F組經(jīng)留置導管注入經(jīng)ATRA干預和Brd U標記的NSCs 10μl;術后8d,D組和F組經(jīng)留置導管注入Ch ABC 10μl/d,連續(xù)7d;各時間點通過留置導管注入生理鹽水保持各組移植液等量。術前及術后不同時間點,用BBB評分和體感誘發(fā)電位(somatosensory evoked potentials,SEP)潛伏期對大鼠后肢神經(jīng)功能進行評價。移植后8周通過HE染色觀察損傷脊髓組織情況,免疫熒光染色觀察移植NSCs存活、神經(jīng)元分化及軸突生長情況。結果:體外應用1.0μmol/L的ATRA誘導NSCs培養(yǎng),可提高NSCs向神經(jīng)元分化的比例。移植后2周開始各組大鼠BBB評分、SEP潛伏期開始觀察到改善,移植治療各組均優(yōu)于損傷對照組,組間BBB評分和SEP潛伏期有差異(P0.05);移植后2周、5周、8周各時間點,B組與C、D、E及F組比較,BBB評分和SEP潛伏期較差(P0.05);在移植治療各組中,F組神經(jīng)功能的恢復最明顯,F組與C、D及E組比較具有較高的BBB評分和較短SEP潛伏期(P0.05)。移植后8周,HE染色顯示:A組細胞結構完整、排列規(guī)則;B組組織結構嚴重破壞,細胞排列紊亂,見大量較大的囊腔及膠質(zhì)瘢痕形成;C、D、E及F組細胞增生明顯,囊腔較少。免疫熒光染色顯示:C、D、E及F組內(nèi)可見橘紅色Brdu標記陽性細胞,F組陽性細胞數(shù)多于C、D和E組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。C、D、E、F組微管相關蛋白-2(microtubule-associated protein 2,MAP-2)標記陽性細胞數(shù)多于B組,F組多于C、D、E組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);C、D、E、F組MAP-2標記陽性細胞面積大于B組,F組大于C、D、E組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:ATRA誘導后NSCs移植可促進大鼠脊髓損傷功能的恢復,且聯(lián)合Ch ABC和NEP1-40移植對損傷脊髓功能的恢復具有協(xié)同促進作用。
【作者單位】： 四川醫(yī)科大學附屬醫(yī)院脊柱外科;
【關鍵詞】： 脊髓損傷 細胞移植 全反式維甲酸 神經(jīng)干細胞 硫酸軟骨素酶ABC Nogo-受體拮抗劑 大鼠
【分類號】：R651.2
【正文快照】： 脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)后,受損脊髓組織神經(jīng)細胞大量丟失,周圍微環(huán)境發(fā)生不利改變,主要包括:內(nèi)源性生長因子缺乏、損傷脊髓周圍硫酸軟骨素蛋白多糖(chondroitin sulphate proteoglycans,CSPGs)及鞘磷脂相關抑制因子表達上調(diào),致使軸突的再生和生長受到限制,脊髓功能

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1 陳金榮;石增立;楊成;劉鳳;石磊;劉巍;袁文丹;;Nogo-66拮抗性多肽的篩選及其對脊髓損傷大鼠軸突再生的影響[J];神經(jīng)解剖學雜志;2010年01期

2 ;[J];;年期

  本文關鍵詞：硫酸軟骨素酶ABC及Nogo-66受體拮抗劑聯(lián)合鼠胚神經(jīng)干細胞移植對大鼠脊髓損傷的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：479789