本文關(guān)鍵詞：ROS介導(dǎo)的NLRP3炎癥小體活化參與燒傷后肺損傷的機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：嚴(yán)重?zé)齻麜?huì)導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)環(huán)境發(fā)生劇烈變化,可對(duì)機(jī)體造成嚴(yán)重?fù)p害。創(chuàng)傷應(yīng)激,熱力的直接損害,組織灌注不足,以及全身炎癥反應(yīng),這種種刺激,使嚴(yán)重?zé)齻?損害不僅僅局限于受損的皮膚,還影響體內(nèi)多種臟器的功能,產(chǎn)生多臟器功能障礙。嚴(yán)重?zé)齻?多臟器功能不全發(fā)病率高達(dá)28.1%,一旦發(fā)生,難以逆轉(zhuǎn)。由于肺臟與外界環(huán)境直接相通,容易受到外界環(huán)境因素的侵襲,因此對(duì)嚴(yán)重?zé)齻颊?尤其是伴有吸入性損傷或基礎(chǔ)肺疾病的患者,肺損傷是燒傷后臟器損傷中最常見的損傷之一。多種因素參與了急性肺損傷的發(fā)病機(jī)制,其歸納起來主要分為兩大部分:細(xì)胞因素和體液因素。細(xì)胞因素包括活化的炎性細(xì)胞如中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及肺固有細(xì)胞如肺泡上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等。體液因素包括各種炎性介質(zhì)、細(xì)胞因子、氧化應(yīng)激等。嚴(yán)重?zé)齻?可以激活其中的多種因素,對(duì)肺臟造成損傷。其中炎性細(xì)胞大量活化,合成和釋放一系列的炎性介質(zhì),從而導(dǎo)致強(qiáng)烈的全身炎癥反應(yīng),是燒傷誘導(dǎo)的肺損傷的重要原因。NLRP3炎癥小體是固有免疫的組成成分,是由多種蛋白組成的復(fù)合體。炎性小體能夠調(diào)節(jié)caspase-1的活化進(jìn)而在天然免疫防御的過程中促進(jìn)細(xì)胞因子前體pro-IL-1β和pro-IL-18的切割成熟,而IL-1β和IL-18是強(qiáng)有力的炎癥啟動(dòng)因子,能夠促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。因此我們推測(cè)NLRP3炎癥小體在燒傷后肺損傷的發(fā)病過程中起著重要作用。故本研究通過體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn),探究了嚴(yán)重?zé)齻驨LRP3炎癥小體信號(hào)通路的表達(dá)及其對(duì)肺損傷的作用,并進(jìn)一步研究了燒傷后NLRP3炎癥小體活化的機(jī)制。實(shí)驗(yàn)方法:1.建立30%總體表面積嚴(yán)重燙傷大鼠肺損傷模型,并檢測(cè)燙傷后各時(shí)間點(diǎn)NLRP3、Caspase-1等炎癥小體信號(hào)在肺組織中的表達(dá)水平及IL-1β、IL-18等炎癥啟動(dòng)因子在血清和肺組織中的表達(dá),探討嚴(yán)重?zé)齻驨LRP3炎癥小體的活化情況并為后續(xù)實(shí)驗(yàn)確定時(shí)間節(jié)點(diǎn)。2.通過腹腔注射NLRP3炎癥小體抑制劑BAY11-7082,觀察其對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠NLRP3炎癥小體信號(hào)通路活化的影響;通過觀察肺組織病理切片,肺損傷指標(biāo)研究其對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠肺損傷的效應(yīng),探討NLRP3炎癥小體在嚴(yán)重?zé)齻蠓螕p傷中的作用。3.通過分離提取大鼠肺泡灌洗液中的肺泡巨噬細(xì)胞并用嚴(yán)重?zé)齻笫笱宕碳砟M燒傷后肺損傷的微環(huán)境,觀察燒傷血清刺激后肺泡巨噬細(xì)胞中NLRP3炎癥小體信號(hào)通路活化情況及ROS產(chǎn)生情況,探討嚴(yán)重?zé)齻驨LRP3炎癥小體活化的可能機(jī)制。4.通過使用ROS清除劑N-acetylcysteine,觀察燒傷血清刺激肺泡巨噬細(xì)胞后NLRP3炎癥小體信號(hào)通路活化情況,明確ROS在嚴(yán)重?zé)齻驨LRP3炎癥小體活化過程中的作用。主要結(jié)果:1.大鼠30%總體表面積燙傷后,肺組織中NLRP3、Caspase-1等炎癥小體信號(hào)及IL-1β、IL-18等炎癥啟動(dòng)因子的基因和蛋白水平在燙傷后48h呈時(shí)間依賴性逐漸升高趨勢(shì),并在24h或48h達(dá)到最高值。2.腹腔注射NLRP3炎癥小體抑制劑BAY11-7082后,嚴(yán)重燙傷大鼠肺組織中的NLRP3、Caspase-1等炎癥小體信號(hào)及IL-1β、IL-18等炎癥啟動(dòng)因子的基因和蛋白水平被顯著抑制,且抑制NLRP3炎癥小體的活化可顯著減輕嚴(yán)重?zé)齻鸬姆尾坎±頁(yè)p害,降低肺部的炎癥水平。3.燒傷血清刺激肺泡巨噬細(xì)胞后,細(xì)胞內(nèi)NLRP3炎癥小體信號(hào)通路顯著活化,ROS水平顯著升高。ROS可能調(diào)控嚴(yán)重?zé)齻驨LRP3炎癥小體的活化。4.使用ROS清除劑后,燒傷血清刺激的肺泡巨噬細(xì)胞中的NLRP3炎癥小體活化程度可被顯著抑制,說明嚴(yán)重?zé)齻驨LRP3炎癥小體的活化是部分ROS依賴的。結(jié)論:燒傷后可激活肺泡巨噬細(xì)胞中的NLRP3炎癥小體信號(hào)通路,而活化的NLRP3炎癥小體可進(jìn)一步促進(jìn)IL-1β和IL-18等炎癥啟動(dòng)因子的表達(dá),進(jìn)而擴(kuò)大炎癥反應(yīng),導(dǎo)致肺損傷。燒傷誘導(dǎo)的NLRP3炎癥小體活化是部分ROS依賴的過程。而抑制NLRP3炎癥小體的活性或清除細(xì)胞內(nèi)過量的ROS,均可有效減輕肺損傷。
【關(guān)鍵詞】：燒傷 肺損傷 NLRP3 炎癥小體 ROS IL-1β IL-18
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R644
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表4-6
• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-14
• 文獻(xiàn)回顧14-28
• 第一部分NLRP3炎癥小體在嚴(yán)重?zé)齻笫蠹毙苑螕p傷中的作用研究28-46
• 1 材料28-31
• 2 方法31-38
• 3 結(jié)果38-43
• 4 討論43-46
• 第二部分ROS在燒傷血清誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞NLRP3炎癥小體活化中的機(jī)制研究46-61
• 1 材料46-49
• 2 方法49-54
• 3 結(jié)果54-58
• 4 討論58-61
• 小結(jié)61-62
• 參考文獻(xiàn)62-74
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果74-75
• 致謝75

  本文關(guān)鍵詞：ROS介導(dǎo)的NLRP3炎癥小體活化參與燒傷后肺損傷的機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：434210