目的:關(guān)節(jié)軟骨缺損和退行性變?nèi)匀皇枪强漆t(yī)師所面臨的重要挑戰(zhàn)。存在于軟骨細(xì)胞外基質(zhì)中的連接蛋白N-端肽(LPP)可誘導(dǎo)類軟骨細(xì)胞中聚集蛋白聚糖和II型膠原的合成。軟骨干/前體細(xì)胞(CSPC)是一種存在于正常關(guān)節(jié)軟骨內(nèi),具有干細(xì)胞活性的細(xì)胞亞群,在軟骨退變和再生中發(fā)揮重要作用。LPP作為天然存在的生物活性分子,有可能參與軟骨內(nèi)源性修復(fù)并發(fā)揮積極作用。軟骨組織工程為軟骨再生提供了新的策略,LPP有望作為生物活性分子,促進(jìn)基于CSPC這一種子細(xì)胞的軟骨組織再生。我們假設(shè),LPP可能影響CSPC的遷移、增殖、分化和軟骨形成等生物學(xué)行為,從而對基于CSPC的軟骨修復(fù)與再生發(fā)揮促進(jìn)作用。方法:利用纖連蛋白差異黏附法從Sprague-Dawley大鼠膝關(guān)節(jié)透明軟骨中分離CSPC,然后通過多系分化試驗(yàn)和表面標(biāo)志物檢測進(jìn)行干細(xì)胞特性鑒定。我們評估了 LPP對CSPC的細(xì)胞活性,細(xì)胞增殖,遷移的影響,以及其對CSPC的趨化效應(yīng)。之后在LPP作用下平面培養(yǎng)CSPC,評估軟骨形成相關(guān)基因和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。在TGF-β3或(和)LPP作用下進(jìn)行CSPC的三維誘導(dǎo)培養(yǎng),獲得微球并進(jìn)行組織學(xué)和免疫組織化學(xué)檢測,綜合評...

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮寫詞表
前言
    參考文獻(xiàn)
中文摘要
Abstract
第一部分: 軟骨干/前體細(xì)胞的分離、提取、鑒定與擴(kuò)大培養(yǎng)
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    附圖
    參考文獻(xiàn)
第二部分: LPP的合成,及其促進(jìn)CSPC增殖、遷移
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    附圖
    參考文獻(xiàn)
第三部分: LPP促進(jìn)CSPC形成軟骨樣組織
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    附圖
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號：4023897