目的:慢性排斥反應(yīng)是導(dǎo)致遠(yuǎn)期移植物功能衰竭的主要原因。移植物動(dòng)脈硬化是不同移植物慢性排斥反應(yīng)中共有的組織病理學(xué)特征。血管平滑肌細(xì)胞(SMC)表型轉(zhuǎn)化是調(diào)節(jié)移植物動(dòng)脈新生內(nèi)膜形成及動(dòng)脈硬化的起始及進(jìn)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本研究旨在探索轉(zhuǎn)錄因子Sox9在移植損傷誘導(dǎo)的移植物動(dòng)脈SMC表型轉(zhuǎn)化中的作用及其潛在的分子機(jī)制。方法:用短發(fā)夾RNA(shRNA)慢病毒載體特異性地敲低移植動(dòng)脈中膜SMC中靶基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá),并建立大鼠動(dòng)脈移植模型。采用H&E及EVG染色對移植動(dòng)脈進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析,采用基因轉(zhuǎn)錄組測序篩選與移植動(dòng)脈SMC分化,增殖等相關(guān)的差異基因,并用免疫組織化學(xué),組織熒光染色及蛋白免疫印跡(western blotting)檢測移植動(dòng)脈中Sox9,血管SMC分化標(biāo)志基因(Calponin和SM22α),自噬相關(guān)分子(Atg5,Atg7,Beclin-1,LC3Ⅰ/Ⅱ等)及增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)水平。在體外,培養(yǎng)大鼠動(dòng)脈SMC,給予藥物刺激,shRNA慢病毒感染及質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)及western blotting定量細(xì)胞內(nèi)相關(guān)分子的mRNA及蛋白表達(dá)。免疫...

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
摘要
Abstract
前言
實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在校期間發(fā)表論文及所獲獎(jiǎng)勵(lì)
致謝



本文編號：3987338