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玻璃化凍存方案對同種異體瓣膜免疫原性的影響及MitoQ對VS83方案組織活性提升作用研究

發(fā)布時間:2024-05-19 09:33
  研究背景:同種瓣具有良好的血流動力學和較高的抗感染特性,但在部分接受同種瓣移植的患者中出現(xiàn)衰敗加速的問題,其原因主要與瓣膜本身的免疫原性和凍存過程中造成的組織損傷有關。近年來,幾種組織玻璃化保存方法被提出,研究顯示玻璃化方案具有降低組織免疫原性的作用。但一方面,其免疫調節(jié)機制不明確,且玻璃化組織活性與免疫原性間的關系存在爭議,另一方面VS83方案中存在嚴重組織活性損害,需要進一步改進。目的:(1)探究VS55方案對帶瓣主動脈組織免疫原性的影響及其與NLRP3炎性小體激活的聯(lián)系,闡明玻璃化組織活性與其免疫原性間的聯(lián)系。(2)在VS83方案中加入抗氧化劑Mito Q,探索該方案對組織活性的提升作用及其對組織細胞線粒體動力學的影響。方法和結果:第一部分研究使用新西蘭兔帶瓣主動脈作為實驗材料,為消除不同保存方法內皮殘留不同對實驗結果造成的影響,我們首先對組織進行了脫內皮處理。將脫內皮后的組織,隨機分為新鮮對照組、梯度降溫組(CFC組)和VS55方案組(IFC組),并使用不同方案保存。8周后取出保存的組織,進行組織復溫,對復溫后組織的活性和組織內ATP水平以及NLRP3炎性小體激活情況進行檢測,...

【文章頁數(shù)】:56 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1組織去內皮效果A:HE染色(100)B:掃描電鏡

圖1.1組織去內皮效果A:HE染色(100)B:掃描電鏡

學分析使用GraphPadPrism6.0軟件進行分析,所得結果以均數(shù)±標準差形較采用t-檢驗,P<0.05時認為差異具有統(tǒng)計學意義。結果培養(yǎng)結果細菌培養(yǎng)結果均為陰性,提示組織處理過程中不存在微生物污染的皮效果(圖1.1)染色顯示,主動脈組織內皮細胞去除完全,除內....


圖1.2帶瓣主動脈組織VG染色結果(40):新鮮組(A),CFC組(B),IFC組(C)

圖1.2帶瓣主動脈組織VG染色結果(40):新鮮組(A),CFC組(B),IFC組(C)

圖1.2帶瓣主動脈組織VG染色結果(40):新鮮組(A),CFC組(B),IFC組(C)4組織活性和ATP含量(圖1.3)如圖所示,在組織活性方面,與對照組相比,CFC組(80.2±1.61%)與IFC組(72%)內活性均有較高程度的保留;CFC....


圖1.3不同組內組織活性(A)和ATP含量(B)檢測結果

圖1.3不同組內組織活性(A)和ATP含量(B)檢測結果

性纖維斷裂的表現(xiàn)。圖1.2帶瓣主動脈組織VG染色結果(40):新鮮組(A),CFC組(B),IFC組(C)2.4組織活性和ATP含量(圖1.3)如圖所示,在組織活性方面,與對照組相比,CFC組(80.2±1.61%)與IFC組(77.91±2%)內....


圖1.4Westernblot法和real-timePCR法測定NLRP3炎性小體的激活情況

圖1.4Westernblot法和real-timePCR法測定NLRP3炎性小體的激活情況

圖1.4Westernblot法和real-timePCR法測定NLRP3炎性小體的激活情況養(yǎng)6h后由real-timePCR法測得NLRP3(A)、IL-1β(B)、caspase-1(C)在轉錄水<0.01與新鮮組比較;*P<0.....



本文編號:3977925

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