目的:骨肉瘤(osteosarcoma,OS),起源于間葉組織,是兒童和青少年中最多見的原發(fā)性惡性骨腫瘤,約占所有原發(fā)惡性骨腫瘤的15%-23%。雖然手術結(jié)合新輔助化療的治療方式顯著改善了骨肉瘤患者的預后,但是,在過去30年里,病人的存活率并沒有顯著的提升,特別對于產(chǎn)生耐藥性的患者或在診斷時就己發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者,臨床治療效果仍然欠佳,存活率仍然小于30%。因此,探討骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展的分子機制,并為骨肉瘤的治療、診斷和預后尋找新的生物標志物是一項重要和迫切的任務。微小RNA(miRNA)是重要的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控因子,這些非編碼小RNAs與特異性同源序列靶轉(zhuǎn)錄物的3’-非翻譯區(qū)(3’-UTR)相結(jié)合,通常會導致靶基因的翻譯抑制和基因的沉默。PDZD2是促進胰島瘤細胞增殖的多PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白,己明確其在前列腺腫瘤發(fā)生過程中上調(diào),但是PDZD2在骨肉瘤中的功能仍不清楚。miRNA的失調(diào)可以通過其對靶基因的調(diào)節(jié)促進腫瘤的發(fā)生,增殖和轉(zhuǎn)移。本研究調(diào)查了 miR-363和PDZD2在骨肉瘤細胞MG-63中的功能,以及miR-363和PDZD2的相互作用關系,以探究miR-363對骨肉瘤細胞的調(diào)控作用及其分子...

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２?ｍｉＲ－３６３與ＰＤＺＤ２的表達呈負調(diào)控關系??

通過對８對骨肉瘤組織和瘤旁組織的ｑＰＣＲ檢測并對比后發(fā)現(xiàn)骨肉瘤組織??中的ｍｉＲ－３６３呈現(xiàn)低表達，而ＰＤＺＤ２的表達則升高（圖１?），且二者表達呈現(xiàn)負??調(diào)控的趨勢（圖２）。結(jié)果有統(tǒng)計學差異。??１４??

圖３不同細胞株中ｍｉＲ－３６３的表達水平??Ｆｉｇ．?３?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｍｉＲ－３６３?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ??

通過對成骨細胞株ｈＦＯＢｌ．１９和骨肉瘤細胞株ＭＧ－６３、ＨＯＳ和Ｓａｏｓ－２的??ｑＰＣＲ檢測，發(fā)現(xiàn)ｍｉＲ－３６３在骨肉瘤細胞株中呈現(xiàn)低表達狀態(tài)，其中ＭＧ－６３細??胞的ｍｉＲ－３６３低表達與其他骨肉瘤細胞相比較顯著（

圖4設計合成的miR-363NC.mimics序列

ａ丄??＊??■?Ｔ??＊＊??丁??ｈＦＯＢ１．１９?ＭＧ－６３?ＨＯＳ?Ｓａｏｓ－２??圖３不同細胞株中ｍｉＲ－３６３的表達水平??Ｆｉｇ．?３?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｍｉＲ－３６３?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ??３．３通過轉(zhuǎn)染使骨肉瘤細....

圖５轉(zhuǎn)染后細胞中ｍｉＲ－３６３的表達??Ｆｉｇ．５?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－３６３?ｉｎ?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ??

３．３通過轉(zhuǎn)染使骨肉瘤細胞中ｍｉＲ－３６３過表達??首先設計合成ｍｉＲ－３６３ＮＣ、ｍｉｍｉｃｓ序列（圖４），轉(zhuǎn)染骨肉瘤細胞ＭＧ－６３；??然后用ｑＰＣＲ檢測轉(zhuǎn)染的效果，如圖５所示，相比ＭＧ－６３＋ＮＣ組，ＭＧ－６３＋ｍｉｍｉｃｓ??組中的ｍｉＲ－３６３含量顯著增高，表明轉(zhuǎn)染可提....

本文編號：3937000