目的:首先探討失血性休克后Sprague Dawley(SD)大鼠膽汁、血清及肝臟中的膽汁酸濃度變化,篩選出潛在的具有肝臟保護(hù)作用的特定類型膽汁酸。然后通過體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)研究該類型膽汁酸是否可保護(hù)失血性休克大鼠的肝臟功能。最后闡明其機(jī)制是否與激活去乙�；�1(sirtuin1,SIRT1)-法尼酯X受體(farnesoid X receptor,FXR)通路調(diào)控肝臟細(xì)胞炎癥、凋亡和增殖等有關(guān)。方法:通過股動(dòng)脈放血法建立SD大鼠失血性休克模型,收集休克后6 h、12 h、24 h組別與對照組別大鼠的膽汁、血清、肝臟,采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)方法檢測分析22種膽汁酸的濃度變化,通過膽汁酸濃度變化趨勢結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道分析篩選出潛在的具有保護(hù)作用的特定類型膽汁酸。體外低氧條件下培養(yǎng)人肝臟腫瘤細(xì)胞系Hep G2細(xì)胞,給予SIRT1激動(dòng)劑SRT1720或牛磺熊脫氧膽酸(tauroursodeoxycholic acid,TUDCA,篩選出的特定類型膽汁酸)干預(yù)。在培養(yǎng)12 h、24 h、36 h后提取細(xì)胞蛋白質(zhì)和m RNA,收集培養(yǎng)上清液。采用蛋白質(zhì)印跡法(Western B...

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1失血性休克大鼠膽汁中的膽汁酸改變Figure.1Changesofbileacidsinbileofratswithhemorrhagicshock說明：在失血性休克造模后6h，12h，24h行膽總管插管引流膽汁10min，然后采用UPLC-MS/MS技術(shù)檢測其中膽汁酸濃度

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文

圖2失血性休克大鼠血清中的膽汁酸改變Figure.2Changesofbileacidsinserumofratswithhemorrhagicshock說明：在失血性休克造模后6h，12h，24h取血液靜置留取血清標(biāo)本，然后采用UPLC-MS/MS技術(shù)檢測其中膽汁酸濃度

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文17圖2失血性休克大鼠血清中的膽汁酸改變Figure.2Changesofbileacidsinserumofratswithhemorrhagicshock說明：在失血性休克造模后6h，12h，24h取血液靜置留取血清標(biāo)本，然后采用UPLC-MS/....

圖3失血性休克大鼠肝臟中的膽汁酸改變Figure.3Changesofbileacidsinliverofratswithhemorrhagicshock說明：在失血性休克造模后6h，12h，24h取肝臟標(biāo)本，然后采用UPLC-MS/MS技術(shù)檢測其中膽汁酸濃度

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文19圖3失血性休克大鼠肝臟中的膽汁酸改變Figure.3Changesofbileacidsinliverofratswithhemorrhagicshock說明：在失血性休克造模后6h，12h，24h取肝臟標(biāo)本，然后采用UPLC-MS/MS技術(shù)檢測....

圖5不同濃度TUDCA刺激HepG2生存率

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文38TUDCA濃度<30μM時(shí)，對HepG2的存活率無顯著影響，當(dāng)濃度TUDCA濃度≥30μM時(shí)，HepG2的存活率明顯下降。圖5不同濃度TUDCA刺激HepG2生存率Figure.5SurvivalrateofHepG2stimulatedbydi....

本文編號(hào)：3912622