目的研究MicroRNA-146a介導IL-6/STAT3信號通路在腰椎間盤退行性變中的機制。方法選擇10例腰椎間盤突出癥患者(觀察組)和10例腰椎爆裂性骨折或骨折脫位需要減壓融合內固定手術的患者(對照組),手術取得病灶髓核組織,qPCR法檢測MicroRNA-146a表達,進行細胞培養(yǎng)和髓核細胞慢病毒轉染預實驗;分別采用MicroRNA-146a 空載體、MicroRNA-146a mimic 和 MicroRNA-146a inhibitor 與兩組細胞共培養(yǎng)24h,檢測轉染效率;采用ELISA法檢測細胞IL-6、Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)水平,Western blot法檢測STAT3、基質金屬蛋白酶(MMP)-3和含Ⅰ型血小板結合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶(ADAMTS)表達水平。結果觀察組細胞MicroRNA-146a水平明顯高于對照組,對照組處理前后IL-6、ColⅡ、aggrecan、STAT3、MMP-3和ADAMTS水平比較均無差異(P>0.05)。處理前觀察組細胞 MicroRNA-146a、IL-6、STAT3、MMP-3 和...

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【學位級別】：博士

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圖１時定量ＰＣ艮法檢測ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ水平（觀察組ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ水平??

??圖１實時定量ＰＣ艮法檢測ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ水平（觀察組ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ水平??明盈高于對照組）??Ｆｉｇｕｒｅ?１；?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ?ｌｅｖｅｌｓ?ｖｉａ?ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?ＰＣ民（ｌｅｖｅｌ....

圖２倒置相差愚微鏡下觀察第２代細胞（２００ｘ，短梭形為主，折光性好，可見??短而粗的突起，向四周呈樹枝狀發(fā)出，有次級突

為了觀察ｍｉＲ－１４６ａ對髓核細胞的調控作用，本實驗，利用酶消化法獲得原??代髓核細胞。倒置相差顯微鏡下觀察第２代細胞，Ｗ短梭形為主，折光性好，??可見短而粗的突起，向四周呈樹枝狀發(fā)出，有次級突。（見圖２）。??圖２倒置相差愚微鏡下觀察第２代細胞（２００ｘ，短梭形為主，折光性好，....

圖４；四組培養(yǎng)條件下的慢病毒感染效果??Ｆｉｇｕｒｅ?４；?Ｔｈｅ?ｅｆＦｉｅｎｃｙ?ｏｆ?ｌｅｎｔｉｖｉｎｉｓ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｉｎ?ｆｏｕｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ??

南京醫(yī)科大學博±學位論文??ｍｉｍｉｃ、ｍｉＲ－１４６ａ?ｍｉｍｉｃ?ｃｏｎｔｒｏｌ、ｍｉＲ－１４６泣?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?及?ｍｉＲ－１４６ａ?ｉｎｈ化ｉｔｏｒ?ｃｏｎｔｒｏｌ??轉染入髓核細胞中。而在進行慢病毒轉染之前，需做預實驗。如圖４所示最佳??感染條件為ＭＯＩ＝１０添加....

圖５；細胞轉染鑒定細胞ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａｍＲＮＡ水平（Ａ為轉染前，觀察組明??

ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ?ｍＲＮＡ?水平提高?１５?倍，而?ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ?ｉ血ｂｉｔｏｒ?處理后??ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａｍＲＮＡ水平降低至原來１／３，證實轉染效果較好。轉染前觀察組??細胞ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａｍＲＮＡ水平明顯高于對照組（Ｐ＜０．０５）。....

本文編號：3908855