臨床研究發(fā)現(xiàn),創(chuàng)傷性腦外傷合并骨折的患者,骨折愈合較單一骨折的患者更快,表現(xiàn)為骨折處更多的骨痂生長(zhǎng),甚至身體其他部位出現(xiàn)異位骨化。既往研究指出其可能機(jī)制是腦外傷使成骨相關(guān)的細(xì)胞因子表達(dá)上調(diào),通過體液調(diào)節(jié)的作用促進(jìn)骨折愈合。外泌體是細(xì)胞分泌的一種納米級(jí)別的膜泡,其內(nèi)含有細(xì)胞特異性蛋白、mi RNA和m RNA等,能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞,進(jìn)而影響其功能。不同細(xì)胞分泌的外泌體中包含不同的成分,導(dǎo)致其功能各異。有研究發(fā)現(xiàn)外泌體在骨代謝的過程中發(fā)揮了重要作用,也有研究發(fā)現(xiàn),創(chuàng)傷后腦組織分泌的外泌體中與成骨相關(guān)的mi RNA的表達(dá)明顯上調(diào)。因此,我們以外泌體為切入點(diǎn),來探究腦外傷促進(jìn)骨折愈合的機(jī)制。第一部分,我們建立小鼠脛骨骨折合并腦外傷模型,通過影像學(xué)檢查來觀察腦外傷對(duì)小鼠脛骨骨折處骨痂量的影響。通過對(duì)脛骨標(biāo)本進(jìn)行組織病理學(xué)檢查,檢測(cè)成骨相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)情況。結(jié)果提示腦外傷能促進(jìn)骨折部位的骨痂過度生長(zhǎng),以及成骨相關(guān)因子的過度表達(dá)。第二部分,我們首先建立小鼠脛骨骨折合并腦外傷模型。收集血液樣本后,采用超速離心法來提取血漿中的外泌體,并對(duì)外泌體進(jìn)行鑒定。利用CCK-8檢測(cè)外泌體對(duì)成骨細(xì)胞增殖的...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖5RUNX2免疫組化染色結(jié)果（10×）

第一部分腦組織來源外泌體在骨折合并腦外傷模型骨愈合中的作用及機(jī)制研究免疫組化結(jié)果顯示：3周時(shí)，TF組的骨痂處可見大量Osterix和RUNX2因子陽性表達(dá)的細(xì)胞，細(xì)胞散在分布于骨小梁表面；SF組的兩種因子的表達(dá)量均較TF組的低。5周時(shí)，TF組和SF組的....

圖2CCK-8結(jié)果*p<0.05

腦組織來源外泌體在骨折合并腦外傷模型骨愈合中的作用及機(jī)制研究3．CCK-8檢測(cè)MC3T3-E1細(xì)胞的增殖率外泌體與ME3T3-E1細(xì)胞共培養(yǎng)24h后，CCK-8結(jié)果顯示TF1組泌體對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞的增殖影響較大。TF1組與SF1組比較，P＜....

圖3ALP檢測(cè)結(jié)果

第二部分腦組織來源外泌體在骨折合并腦外傷模型骨愈合中的作用及機(jī)制研究4．堿性磷酸酶（ALP）染色及活性檢測(cè)ME3T3-E1細(xì)胞成骨誘導(dǎo)7天，經(jīng)過TF1組外泌體干預(yù)的細(xì)胞ALP染色更深，即ALP表達(dá)更多。（圖3a）ALP活性檢測(cè)提示TF1組較SF1....

圖4WesternBlot結(jié)果

腦組織來源外泌體在骨折合并腦外傷模型骨愈合中的作用及機(jī)制研究第二部分5．WesternBlot檢測(cè)WesternBlot結(jié)果提示TF1組的COL1A1和RUNX2蛋白的表達(dá)量較SF1組明顯增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。（圖4）

本文編號(hào)：3894818