目的:探討RES是否可通過調(diào)控TLR4與PI3K/Akt信號通路發(fā)揮抗IL-1β誘導(dǎo)的SW1353細(xì)胞炎癥反應(yīng)效應(yīng),為進(jìn)一步闡明OA的發(fā)病機(jī)制及探索OA的營養(yǎng)治療提供實驗依據(jù)。方法:SW1353細(xì)胞系購置于中國科學(xué)院上海生科院細(xì)胞資源中心。CCK-8法檢測不同濃度RES(0¹00μmol/L)對加/不加IL-1β(10 ng/mL)處理對SW1353細(xì)胞增殖活力的影響;不同濃度TLR4抑制劑CLI-095及PI3K抑制劑LY294002對細(xì)胞增殖活力的影響。ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中MMP-13表達(dá)水平;Western blot法檢測TLR4、p-Akt及Akt的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1、不同濃度RES和/或IL-1β對細(xì)胞增殖活力的影響與空白對照組相比,DMSO對細(xì)胞增殖活力無明顯影響(P>0.05);與DMSO組相比,RES(3.125²5μmol/L)可促進(jìn)細(xì)胞增殖活力(P<0.01),RES(100μmol/L)則顯著抑制細(xì)胞增殖活力(P<0.05);IL-1β(10 ng/mL)處理對細(xì)胞增殖活力無明顯影響(P&...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 軟骨細(xì)胞來源
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 試劑配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 SW1353細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 細(xì)胞增殖活力檢測
        2.2.3 細(xì)胞處理
        2.2.4 ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中MMP-13表達(dá)水平
        2.2.5 Westernblot法檢測TLR4、p-Akt、Akt的蛋白表達(dá)水平
    2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果
    3.1 不同濃度RES和/或IL-1β處理對SW1353細(xì)胞增殖活力的影響
    3.2 RES對IL-1β處理的SW1353細(xì)胞分泌MMP-13水平影響
    3.3 RES對IL-1β處理的SW1353細(xì)胞中TLR4蛋白表達(dá)的影響
    3.4 IL-1β處理對SW1353細(xì)胞中PI3K/Akt信號通路的影響
    3.5 RES處理對SW1353細(xì)胞中PI3K/Akt信號通路的影響
    3.6 TLR4信號通路抑制后,RES對IL-1β處理的SW1353細(xì)胞中PI3K/Akt信號通路的影響
    3.7 PI3K/Akt信號通路抑制后,RES對IL-1β處理的SW1353細(xì)胞中TLR4信號通路的影響
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3887194