目的:腸道被認(rèn)為是創(chuàng)傷/失血性休克后啟動MODS的“中心器官”。理解創(chuàng)傷/失血性休克時腸道損傷的機(jī)制有助于在臨床上尋找治療創(chuàng)傷/失血性休克相關(guān)腸道功能障礙及MODS的方法。本實驗的目的是應(yīng)用微透析的方法檢測創(chuàng)傷/失血性休克對大鼠腸道屏障功能及腸道代謝產(chǎn)物的影響,并探索腸道代謝產(chǎn)物變化與腸道損傷及修復(fù)機(jī)制之間的可能關(guān)系。研究方法:構(gòu)建大鼠創(chuàng)傷/失血性休克模型。大鼠分為創(chuàng)傷/失血性休克組(THS)及創(chuàng)傷/假休克組(TSS)。THS組大鼠的休克時間為55分鐘,休克血壓為30mmHg,開腹制造創(chuàng)傷,復(fù)蘇液體為所抽血液混合2倍體積生理鹽水;復(fù)蘇期為2小時,恢復(fù)期為6小時。TSS組僅接受麻醉、開腹及血壓監(jiān)測,無休克及復(fù)蘇過程。微透析導(dǎo)管放置方式選取大鼠末端回腸的腸腔粘膜側(cè)與腸管漿膜側(cè),總體灌流時間為10小時,每小時收集灌流后的透析液,分析葡萄糖、乳酸、甘油、丙酮酸、谷氨酸的濃度變化。進(jìn)行大鼠不同時間點的動脈血氣分析及血常規(guī)檢查以保證模型有效性。通過FITC-Dextran灌胃后熒光分光光度計的方式檢測大鼠腸道通透性變化。對大鼠腸道病理標(biāo)本分別進(jìn)行HE染色觀察腸絨毛結(jié)構(gòu),計算腸道損傷評分,計數(shù)絨毛高...

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分:腸道微透析代謝產(chǎn)物在創(chuàng)傷/失血性休克大鼠腸屏障功能障礙中的作用和意義
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器和耗材
        2.2 研究對象和試驗方法
            2.2.1 創(chuàng)傷/失血性休克大鼠模型的建立
            2.2.2 大鼠血氣及血色素指標(biāo)的變化
            2.2.3 微透析檢測
            2.2.4 腸道通透性檢測
            2.2.5 腸道HE染色及病理
            2.2.6 Westernblot檢測腸屏障緊密連接蛋白ZO-1、occludin、claudin-2含量
            2.2.7 RealtimePCR檢測腸屏障緊密連接蛋白ZO-1、occludin、claudin-2的基因表達(dá)
            2.2.8 ELISA法測定腸管細(xì)胞因子TNF–α、IL-6、IL-1β、IL-4、IL-10和IFN-γ含量
            2.2.9 統(tǒng)計分析
    3 結(jié)果
        3.1 創(chuàng)傷/失血性休克大鼠模型效果評價
        3.2 創(chuàng)傷/失血性休克大鼠腸道微透析代謝產(chǎn)物變化
            3.2.1 創(chuàng)傷/失血性休克大鼠腸道微透析代謝產(chǎn)物葡萄糖、乳酸、丙酮酸、甘油的變化趨勢
            3.2.2 創(chuàng)傷/失血性休克大鼠腸道粘膜側(cè)微透析代謝產(chǎn)物與漿膜側(cè)微透析代謝產(chǎn)物的比較
            3.2.3 創(chuàng)傷/失血性休克大鼠腸道微透析谷氨酸的變化：
        3.3 創(chuàng)傷/失血性休克破壞大鼠腸屏障完整性及腸屏障功能:
        3.4 創(chuàng)傷/失血性休克使大鼠腸道局部炎癥反應(yīng)增加:
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分:創(chuàng)傷/失血性休克大鼠的腸道損傷與微透析谷氨酸及谷氨酸代謝調(diào)節(jié)的關(guān)系及機(jī)制探索
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器和耗材
        2.2 研究對象和試驗方法
            2.2.1 創(chuàng)傷/失血性休克模型建立
            2.2.2 血氣及血色素指標(biāo)的變化
            2.2.3 腸絨毛結(jié)構(gòu)與腸道粘液層損傷評估
            2.2.4 利用高效液相色譜進(jìn)行血及組織氨基酸檢測
            2.2.5 Westernblot檢測大鼠腸粘膜谷氨酰胺酶含量：
            2.2.6 腸粘膜內(nèi)谷氨酰胺酶活性測定
            2.2.7 RealtimePCR檢測谷氨酰胺酶mRNA的表達(dá)
            2.2.8 統(tǒng)計分析
    3 結(jié)果
        3.1 創(chuàng)傷/失血性休克大鼠模型效果評價
        3.2 創(chuàng)傷/失血性休克造成大鼠腸道結(jié)構(gòu)損傷、粘液層破壞及屏障功能障礙
        3.3 創(chuàng)傷/失血性休克大鼠血漿谷氨酸及谷氨酰胺的濃度變化
        3.4 創(chuàng)傷/失血性休克大鼠腸粘膜組織谷氨酸及谷氨酰胺的濃度變化
        3.5 創(chuàng)傷/失血性休克大鼠改變大鼠腸粘膜組織谷氨酰胺酶含量、基因表達(dá)及谷氨酰胺酶活性
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3859985