目的:利用KLD-12多肽緩釋的特性,復合合適劑量的重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(Recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2),構建具有生物活性的組織工程支架材料KLD-12多肽/rhBMP-2凝膠復合骨髓間充質干細胞(BMSCs),探討該納米纖維凝膠材料誘導BMSCs成骨活性的實驗研究。方法:取3月齡(雌雄不限)新西蘭大白兔骨髓,采用密度梯度法分離并培養(yǎng)BMSCs。取第3代BMSCs分別采用適合濃度的rhBMP-2∕KLD-12多肽體外三維培養(yǎng)(實驗組)和KLD-12多肽培養(yǎng)(對照組),誘導BMSCs成骨。培養(yǎng)2、5、7、10、14d細胞計數(shù)試劑盒8(cell counting kit-8)法檢測檢測兩組凝膠內細胞增殖活性;培養(yǎng)7、14d鈣黃綠素(Calcein-AM)/碘化丙啶(PI)熒光染色觀察實驗組與對照組凝膠內活細胞與死細胞數(shù)量,計算活細胞比率;3、7、10、14、21 d檢測兩組細胞培養(yǎng)基中堿性磷酸酶(ALP)及骨鈣蛋白(Osteocalcin,OCN)含量;培養(yǎng)14 d兩組細胞行Ⅰ型膠原免疫熒光染色觀察,實時熒...

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

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