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脊髓損傷后長(zhǎng)鏈非編碼RNA表達(dá)變化及其對(duì)神經(jīng)元突起生長(zhǎng)的調(diào)控作用

發(fā)布時(shí)間:2023-04-23 12:14
  【目的】脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是指由于外力作用于脊柱并導(dǎo)致相應(yīng)脊髓壓迫或斷裂,進(jìn)而造成傳導(dǎo)通路中斷以及對(duì)應(yīng)節(jié)段感覺(jué)運(yùn)動(dòng)功能的障礙。脊髓損傷作為一種嚴(yán)重的致殘性中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷,其會(huì)嚴(yán)重降低患者的生活質(zhì)量并增加患者生活與經(jīng)濟(jì)上的負(fù)擔(dān)。近些年來(lái),國(guó)內(nèi)外脊髓損傷發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì),然而由于脊髓損傷的病理分子機(jī)制極其復(fù)雜,因此臨床上對(duì)脊髓損傷修復(fù)缺少行之有效的方法。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是具有調(diào)控基因表達(dá)作用的以一種非編碼RNA。近些年來(lái)關(guān)于長(zhǎng)鏈非編碼RNA的相關(guān)研究越來(lái)越多,且其在脊髓損傷病理變化中的作用也亟待闡明。本研究擬通過(guò)應(yīng)用microarray芯片——高通量組學(xué)方法對(duì)大鼠脊髓損傷后不同時(shí)間點(diǎn)的信使RNA(messenger RNA,mRNA)和lncRNAs表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè),并通過(guò)生物信息學(xué)分析得到可能參與脊髓損傷后關(guān)鍵生物學(xué)過(guò)程的差異表達(dá)mRNA及l(fā)ncRNA。此外本研究擬進(jìn)一步驗(yàn)證并闡明關(guān)鍵lncRNA的功能,為脊髓損傷提供新的潛在治療靶點(diǎn)!痉椒ā勘菊n題首先制備大鼠脊髓挫傷模型,應(yīng)用micro...

【文章頁(yè)數(shù)】:125 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、脊髓損傷后mRNA的表達(dá)譜分析
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與器械
        1.1.2 大鼠脊髓挫傷模型制備
        1.1.3 芯片檢測(cè)
        1.1.4 生物信息學(xué)分析
        1.1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 大鼠脊髓挫傷模型制備
        1.2.2 樣本RNA質(zhì)檢
        1.2.3 生物信息學(xué)分析
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、脊髓損傷后lncRNA的表達(dá)譜分析
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與器械
        2.1.2 大鼠脊髓挫傷模型制備
        2.1.3 芯片檢測(cè)
        2.1.4 生物信息學(xué)分析
        2.1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 樣本聚類(lèi)及相關(guān)性分析
        2.2.2 差異lncRNAs的篩選
        2.2.3 差異lncRNAs的功能分析
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、NONRATT006058 調(diào)控Brca1 抑制神經(jīng)元突起生長(zhǎng)的研究
    3.1 對(duì)象和方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與器械
        3.1.2 qRT-PCR驗(yàn)證關(guān)鍵mRNA及 lncRNA
        3.1.3 大鼠脊髓神經(jīng)元原代培養(yǎng)
        3.1.4 熒光原位雜交明確NONRATT006058 在神經(jīng)元內(nèi)定位
        3.1.5 慢病毒過(guò)表達(dá)NONRATT006058 大鼠神經(jīng)元細(xì)胞模型構(gòu)建
        3.1.6 NONRATT006058 特異性RNA抑制劑感染神經(jīng)元
        3.1.7 qRT-PCR檢測(cè)NONRATT006058及Brca1 表達(dá)變化
        3.1.8 Westem blot檢測(cè)Brca1 表達(dá)變化
        3.1.9 神經(jīng)元免疫細(xì)胞熒光染色觀(guān)察突起生長(zhǎng)
        3.1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 NONRATT006058 與其靶基因Brca1 表達(dá)變化初步驗(yàn)證
        3.2.2 大鼠神經(jīng)元細(xì)胞原代培養(yǎng)及明確NONRATT006058 定位
        3.2.3 過(guò)表達(dá)及抑制表達(dá)NONRATT006058 大鼠神經(jīng)元細(xì)胞模型構(gòu)建
        3.2.4 NONRATT006058 在大鼠神經(jīng)元中可調(diào)節(jié)Brca1 表達(dá)
        3.2.5 NONRATT006058 調(diào)控大鼠神經(jīng)元突起生長(zhǎng)
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
附錄
綜述 長(zhǎng)鏈非編碼RNA與脊髓損傷的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào):3799695

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