目的:觀察踝關(guān)節(jié)注射A型肉毒毒素(Botulinum toxin type A,BoNT/A)對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠疼痛行為及脊髓中樞水平小膠質(zhì)細(xì)胞激活、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表達(dá)的影響,探討B(tài)oNT/A對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎疼痛的治療作用及可能的機(jī)制。方法:實(shí)驗(yàn)1.本研究隨機(jī)選取80只雄性SD大鼠左踝關(guān)節(jié)腔注射50μl完全弗氏佐劑(complete freund’s adjuvant,CFA)制作佐劑性關(guān)節(jié)炎疼痛模型,另選16只大鼠注射同等體積生理鹽水作為對(duì)照,并分別于建模前1天及建模后第1、3、7、14和21天對(duì)大鼠機(jī)械痛閾和熱痛閾進(jìn)行測定以及應(yīng)用HE染色技術(shù)觀察踝關(guān)節(jié)病理變化。評(píng)估CFA造模情況。實(shí)驗(yàn)2.造模成功后,對(duì)大鼠左踝關(guān)節(jié)腔注射BoNT/A進(jìn)行干預(yù),并按照注射濃度不同分為1UBoNT/A組、5UBoNT/A組、10UBoNT/A組,CFA組及sham組再次注射同等體積生理鹽水。實(shí)驗(yàn)過程中剔除造模失敗或死亡的大鼠,最終以每組16只SD大鼠納入實(shí)驗(yàn)。即5組分別為sham組、CFA組、1UBoNT/A組、5UBoNT/A組、10UBo...

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一部分 經(jīng)踝關(guān)節(jié)腔注射完全弗氏佐劑制作佐劑型關(guān)節(jié)炎疼痛大鼠模型
    材料和方法
        1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.主要實(shí)驗(yàn)儀器與試劑藥品
            2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
            2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑藥品
        3.實(shí)驗(yàn)分組
        4.佐劑性關(guān)節(jié)炎疼痛模型制作
        5.疼痛行為學(xué)測試
            5.1 機(jī)械痛撤足閾值測試
            5.2 熱痛閾潛伏期測試
        6.踝關(guān)節(jié)病理組織學(xué)觀察
        7.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    結(jié)果
    討論
第二部分 A型肉毒毒素踝關(guān)節(jié)腔注射對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎疼痛大鼠模型治療作用
    材料與方法
        1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑藥品
            2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
            2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        3.動(dòng)物分組
        4.模型建立
        5.BoNT/A關(guān)節(jié)腔注射
        6.疼痛行為測試
            6.1 機(jī)械痛撤足閾值測試
            6.2 熱痛閾潛伏期測試
        7.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    結(jié)果
    討論
第三部分 A型肉毒毒素治療大鼠慢性炎癥性疼痛的作用機(jī)制研究
    材料與方法
        1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
        2.主要實(shí)驗(yàn)儀器與實(shí)驗(yàn)試劑
        3.組織獲取
        4.組織總蛋白提取
        5.Western Blot分析
        6.免疫熒光組織化學(xué)
            6.1 灌注取材
            6.2 組織蠟塊的制作和切片
            6.3 免疫熒光染色
        7.定量RT-PCR分析
            7.1 逆轉(zhuǎn)錄(RT)
            7.2 引物設(shè)計(jì)
            7.3 RT-PCR
        8.ELISA檢測
        9.同源性建模與分子對(duì)接
        10.數(shù)據(jù)處理
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄
致謝



本文編號(hào)：3786208