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新型器官保存液的研制及其對大鼠肺臟低溫保存的效果研究

發(fā)布時間:2022-12-09 02:43
  背景:器官保存液與缺血再灌注損傷及維持器官活性密切相關。Perfadex是一種有效的、也是目前應用最廣的肺保存液。但是,其總體肺保存時間有限(≤12小時),并且其術后原發(fā)性移植物失功(primary graft dysfunction,PGD)的幾率達10-20%。此外,其昂貴的價格也限制了其在國內(nèi)移植領域的廣泛應用。所以,研制一種新型的經(jīng)濟有效的器官保存液勢在必行。方法:將肺上皮細胞(BEAS-2B)或肺微血管內(nèi)皮細胞(HPMEC)培養(yǎng)至80-90%融合,去除細胞培養(yǎng)基,分別加入不同的待測保存液,如Perfadex,PBS,0.9%Na Cl,Steen液,DMEM,DMEM+10%FBS等,然后將細胞置入4℃充滿50%O2(含或不含5%CO2)的細胞冷凍箱中來模擬冷缺血過程。18 h或42 h后,將細胞分別轉回到37℃常規(guī)細胞培養(yǎng)基環(huán)境來模擬再灌注過程,再灌注4 h。隨后,應用MTS測驗來評估細胞活性。我們以傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)基營養(yǎng)成份搭配為基礎,研制成新型的器官保存液JT-1,并將其在大鼠肺冷缺血模型上進行驗證,大鼠肺臟在不同的保存液中低溫(4℃)保存24 h后,采集標本并進行檢測及... 

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
前言
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞對照表
第1章 文獻綜述
    1 器官移植的歷史及國內(nèi)外肺移植現(xiàn)狀
        1.1 器官移植的起源和早期嘗試
        1.2 國內(nèi)外肺移植現(xiàn)狀
    2 器官保存損傷的機制
    3 器官保存技術
        3.1 靜態(tài)冷保存
        3.2 器官保存液
        3.3 體外肺灌注技術(ex vivo lung perfusion, EVLP)
        3.4 常用的體外肺灌注液
    4 結論
    參考文獻
第2章 新型器官保存液的研制、篩選和優(yōu)化
    2.1 研究背景
    2.2 缺血再灌注損傷細胞模型的建立
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗方法
    2.3 器官保存液的成分篩選和優(yōu)化(細胞再灌注損傷模型)
        2.3.1 實驗材料
        2.3.2 實驗方法
        2.3.3 研究結果
        2.3.4 研究結論
    2.4 新型器官保存液JT-1 對細胞缺血再灌注損傷的保護作用
        2.4.1 新型器官保存液的配制
        2.4.2 定性分析
        2.4.3 穩(wěn)定性
        2.4.4 新型器官保存液對細胞缺血再灌注損傷的保護作用
    2.5 小結
第3章 新型器官保存液JT-1 對大鼠肺臟低溫保存的效果評價
    3.1 研究背景
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗動物和分組
        3.2.2 實驗所需儀器設備
        3.2.3 肺獲取和保存
        3.2.4 肺組織標本的采集
        3.2.5 標本的處理及觀察指標
        3.2.6 統(tǒng)計學分析
    3.3 實驗結果
    3.4 小結
第4章 結論
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
致謝



本文編號:3714653

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