發(fā)布時間：2022-10-30 10:14

　　目的:LKB1在諸多腫瘤中出現(xiàn)表達異常和突變,但在骨肉瘤中的詳盡功能還未見報道。本課題旨在通過對LKB1在骨肉瘤細胞內(nèi)分子機制的研究,為臨床上對于預防和治療骨肉瘤提供了理論支持和新策略。方法:利用酵母雙雜交的方法篩選與LKB1相互作用的蛋白,免疫共沉淀加以驗證,并且通過細胞侵襲實驗,CCK8細胞活力測定等實驗檢測其對于骨肉瘤細胞增殖能力的影響。結(jié)果:通過篩選得到RNF8、BAP1、HERC3等三個基因與LKB1存在相互作用,免疫共沉淀結(jié)果陽性。RNF8通過調(diào)控LKB1促進骨肉瘤細胞的增殖能力,BAP1通過增強LKB1進而抑制骨肉瘤細胞的增殖能力。結(jié)論:RNF8、BAP1通過調(diào)控LKB1的泛素化修飾對于骨肉瘤的增殖發(fā)揮作用。 

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
第一部分 前言
    1.骨肉瘤的研究現(xiàn)狀
    2.LKB1研究現(xiàn)狀
    3.蛋白泛素化
    4.酵母雙雜交
    5.技術(shù)路線圖
    參考文獻
第二部分 材料和方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗方法
第三部分 實驗結(jié)果
    3.1 篩選驗證LKB1的相互作用蛋白
    3.2 LKB1穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的構(gòu)建
    3.3 LKB1 mRNA水平檢測
    3.4 RNF8通過調(diào)控LKB1泛素化修飾參與骨肉瘤細胞的功能
    3.5 RNF8、BAP1參與骨肉瘤細胞的增殖
第四部分 討論
第五部分 結(jié)論
第六部分 參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄
    附錄1 試劑和溶液
    附錄2 縮略詞及術(shù)語表
    附錄3 引物等信息
攻讀學位期間公開發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3698700