目的 牙髓干細(xì)胞（dental pulp stem cells,DPSCs）是目前國內(nèi)外研究骨組織工程的理想細(xì)胞,究其原因是細(xì)胞來源容易獲得,且功能多元化,近年來其研究成果不斷取得突破。研究表明,長鏈非編碼RNA（IncRNA）在間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過程中起著相當(dāng)重要的作用。然而,IncRNA是否參與DPSCs的成骨分化尚不清楚。本研究旨在檢測IncRNA是否參與DPSCs成骨分化過程。通過RNA測序（RNA-Seq）逆轉(zhuǎn)錄-定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-qPCR）及分析驗證,確定成骨分化不同階段中的IncRNA表達(dá)的不同變化。結(jié)果1.TNF-α促進(jìn)DPSC的成骨分化:在第7天和14天時,分別在培養(yǎng)牙髓干細(xì)胞的培養(yǎng)基中加10 ng/mL TNF-α。在第7天,用TNF-α刺激后,ALP染色顯示其在成骨分化過程中強(qiáng)陽性表達(dá),表明DPSCs正在進(jìn)行成骨分化。而在細(xì)胞培養(yǎng)第14天時用TNF-α干預(yù),ALP染色顯示陽性表達(dá)增加至85-90%。這些結(jié)果表明,在牙髓干細(xì)胞分化過程中,經(jīng)TNF-α誘導(dǎo)情況下,促進(jìn)DPSC的成骨分化。2.成骨分化過程中基因表達(dá)變化:為了進(jìn)一步驗證牙髓干細(xì)胞成骨分化基因表達(dá)的... 

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 課題研究的目的和意義
    1.2 國內(nèi)外研究概況
        1.2.1 牙髓干細(xì)胞(DPSCs)
        1.2.2 牙髓干細(xì)胞分化過程中的信號通路
        1.2.3 長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)
        1.2.4 牙髓干細(xì)胞與lncRNA的相關(guān)性
        1.2.5 總結(jié)
    1.3 論文的主要研究內(nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 研究資料及儀器設(shè)備
        2.1.1 組織標(biāo)本
        2.1.2 牙髓干細(xì)胞培養(yǎng)
        2.1.3 實驗試劑
        2.1.4 實驗儀器及耗材
    2.2 實驗流程與方法
        2.2.1 成骨細(xì)胞分化模型、堿性磷酸酶(ALP)染色
        2.2.2 RNA提取,RNA-seq和生物信息學(xué)分析
        2.2.3 RT-qPCR
        2.2.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.5 統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 結(jié)果
    3.1 TNF-A促進(jìn)DPSC的成骨分化
    3.2 成骨分化過程中基因表達(dá)變化
    3.3 在DPSCs成骨分化過程中的INCRNA表達(dá)的變化
    3.4 LNCRNA和MRNA在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過程中的差異表達(dá)
    3.5 INCRNA差異表達(dá)的分析
    3.6 由TNF-α誘導(dǎo)的高效的成骨分化需要LNcRNA XIST
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
英文縮寫詞表
在攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文與參加的項目
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]生理性根吸收過程中乳牙牙髓干細(xì)胞通過α7 nAChR調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞分化能力的研究[J]. 汪璐璐,袁帥,杜樣,周志斐,鄔禮政,王小競.  實用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(02)
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本文編號：3667019