發(fā)布時間：2022-02-11 09:21

　　目的建立大鼠骨癌痛（bone cancer pain,骨癌痛）模型,檢測骨癌痛大鼠脊髓M-CSF的表達,并初步探討M-CSF對骨癌痛痛覺敏化影響的作用機制,以期為骨癌痛的治療方法提供新的理論依據(jù)。方法1.制備脛骨注射用Walker256乳腺癌細(xì)胞取Walker256乳腺癌細(xì)胞（上海素冉生物科技有限公司）腹腔注射入150¹80g的健康成年雄性SD大鼠。每日觀察大鼠腹部種植乳腺癌細(xì)胞的變化,5⁷天后形成腹水并抽取。用PBS溶液漂洗并離心（轉(zhuǎn)數(shù)800r/min）抽取的腹水3次,每次離心5min。制備好的癌細(xì)胞置于冰塊上。2.實驗動物重約170²10g的健康成年雄性SD大鼠（濟南鵬越有限責(zé)任公司）,于24±0.5℃室溫下,晝夜各12小時自由飲食喂養(yǎng)。3.鞘內(nèi)置管與之前的研究報道相同,在大鼠注入麻醉劑后,將PE-10導(dǎo)管置于蛛網(wǎng)膜下腔腰膨大位置。4.骨癌痛大鼠模型的制備參考既往骨癌痛模型的相關(guān)研究,取鞘內(nèi)置管成功的大鼠并將Walker256乳腺癌細(xì)胞（10ul 5X10⁶細(xì)胞/毫升）注入大鼠右側(cè)脛骨上端骨髓腔... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料與方法
    1 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗分組
            1.2.1 骨癌痛模型的建立
            1.2.2 M-CSF、Iba1和P2X4R在大鼠骨癌痛模型脊髓中的表達
            1.2.3 M-CSF受體阻斷劑對大鼠骨癌痛的影響
        1.3 實驗儀器
        1.4 實驗試劑和耗材
    2 試驗方法
        2.1 Walker256 乳腺癌細(xì)胞的復(fù)蘇與培養(yǎng)
        2.2 制備大鼠骨癌痛模型
        2.3 鞘內(nèi)置管
        2.4 機械痛閾值測試
        2.5 Western Blot
            2.5.1 組織取材
            2.5.2 Western Blot步驟
        2.6 免疫熒光
            2.6.1 組織取材
            2.6.2 免疫熒光方法
    3 統(tǒng)計分析
結(jié)果
    1 骨癌痛模型建立后大鼠機械縮足反應(yīng)閾值的變化
    2 骨癌痛模型建立后巨噬細(xì)胞集落刺激因子M-CSF在大鼠脊髓的表達情況
    3 鞘內(nèi)注射巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體阻斷劑GW2580對BCP大鼠的機械縮足反應(yīng)閾值的影響
    4 鞘內(nèi)注射巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體阻斷劑GW2580 對大鼠脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞激活以及P2X4R表達的影響
    5 鞘內(nèi)注射巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體阻斷劑GW2580 對脊髓背角小膠質(zhì)細(xì)胞P2X4R表達的影響
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號：3620021