目的:組織工程神經(jīng)移植物作為一種有替代自體神經(jīng)移植潛力的方法,目前廣泛用于周圍神經(jīng)缺損修復(fù)的研究。組織工程神經(jīng)支架的核心因素通常包括:理想的種子細胞、物理支架材料、神經(jīng)營養(yǎng)因子及細胞外基質(zhì)。本研究以創(chuàng)傷性神經(jīng)瘤組織為基礎(chǔ),將其與殼聚糖套管復(fù)合構(gòu)建一種新型的組織工程神經(jīng)移植物,用于原位修復(fù)神經(jīng)瘤切除所遺留神經(jīng)缺損（10mm）,并評價其修復(fù)效果。方法:（1）通過SD大鼠坐骨神經(jīng)單純橫斷、近側(cè)斷端結(jié)扎的方法構(gòu)建創(chuàng)傷性神經(jīng)瘤模型,借助超聲彈性成像、免疫組織化學(xué)染色等實驗方法驗證模型的有效性,明確神經(jīng)瘤組織的成分。（2）通過體外實驗,將神經(jīng)瘤組織與雪旺細胞（SCs）、背根神經(jīng)節(jié)（DRG）分別共培養(yǎng),借助免疫熒光染色、CCK8、ELISA等實驗方法評價雪旺細胞增殖、分泌及背根神經(jīng)節(jié)軸突生長的影響。（3）通過動物體內(nèi)實驗,以神經(jīng)瘤組織微粒為基礎(chǔ),通過與殼聚糖套管復(fù)合構(gòu)建組織工程神經(jīng)移植物,并將其用于原位修復(fù)神經(jīng)瘤切除所遺留神經(jīng)缺損（10mm）。實驗動物隨機分為三組:Neuroma組（填充神經(jīng)瘤微粒的殼聚糖導(dǎo)管組,n=10）、Hollow組（單純殼聚糖導(dǎo)管組,n=10）,Sham組（假手術(shù)組,n=10... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２模型構(gòu)建術(shù)后３周神經(jīng)瘤超聲圖

?祌經(jīng)瘤模型構(gòu)建術(shù)后３周大體觀察，坐骨神經(jīng)近側(cè)端斷端呈梭形增生，呈球??根狀，質(zhì)地中等，與周圍組織界限清楚（圖１．３）。??ＢＨ??圖１．３模型構(gòu)建術(shù)后３周神經(jīng)瘤大體結(jié)構(gòu)，Ａ為在體時神經(jīng)瘤大體觀，Ｂ為離體??時神經(jīng)瘤大體觀。??３．４組織化學(xué)染色??ＨＥ染色：術(shù)后３周神經(jīng)瘤組織內(nèi)部有炎癥細胞浸潤，神經(jīng)纖維排列結(jié)構(gòu)??破壞明顯；正常祌經(jīng)纖維排列規(guī)則致密，無炎癥細胞浸潤（見圖１．４）；??Ｍａｓｓｏｎ染色：術(shù)后３周神經(jīng)瘤組織內(nèi)部紅染的神經(jīng)纖維結(jié)構(gòu)破壞，排列雜??亂無序，比例下降，內(nèi)部可見大量增生的藍染的膠原纖維；正常神經(jīng)內(nèi)神經(jīng)纖維??結(jié)構(gòu)呈軸向規(guī)則、致密排列（見圖１．４）；??Ｓ１００／ＮＦ２００／ＤＡＰＩ染色：術(shù)后３周神經(jīng)瘤組織免疫熒光染色示紅染的為Ｓ１００??蛋白，標記的是雪旺細胞，可見神經(jīng)瘤組織中紅染的雪旺細胞比例相較于正常神??經(jīng)顯著提高；綠染色是ＮＦ２００，標記的是軸突結(jié)構(gòu)，可見神經(jīng)瘤瘤內(nèi)部大量不規(guī)??則增生神經(jīng)纖維

圖１．４術(shù)后３周神經(jīng)瘤組織及正常神經(jīng)組織組織化學(xué)染色??Ｍｉｒ：?ｍ??圖１．５術(shù)后３周神經(jīng)瘤組織免疫熒光染色（ｌａｍｉｎｉｎ／ｆｌｂｒｏｎｅｃｔｉｎ）??１４??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Current progress in use of adipose derived stem cells in peripheral nerve regeneration[J]. Shomari DL Zack-Williams,Peter E Butler,Deepak M Kalaskar.  World Journal of Stem Cells. 2015(01)



本文編號：3613636