第一部分小鼠關(guān)節(jié)軟骨來(lái)源祖細(xì)胞的提取與鑒定目的:從小鼠關(guān)節(jié)軟骨中分離培養(yǎng)關(guān)節(jié)軟骨來(lái)源祖細(xì)胞（Articular Cartilage-derived Progenitor Cells,ACPCs）,觀察 ACPCs 的細(xì)胞形態(tài),鑒定其增殖、分化能力及表面標(biāo)志物,探究小鼠ACPCs的細(xì)胞特性,為軟骨組織工程提供合適的種子細(xì)胞。方法:無(wú)菌條件從5天齡,雄性C57BL/6小鼠各關(guān)節(jié)中獲得軟骨組織,以Ⅳ型膠原酶消化6-8h,獲得細(xì)胞懸液。采用纖連蛋白分黏附分選法獲得小鼠ACPCs。流式細(xì)胞術(shù)鑒定其表面標(biāo)志物表達(dá)。待細(xì)胞長(zhǎng)至80%行倒置顯微鏡觀察其細(xì)胞形態(tài);克隆形成實(shí)驗(yàn)評(píng)估其增殖能力;三系誘導(dǎo)檢測(cè)細(xì)胞多系分化能力。結(jié)果:倒置顯微鏡觀察顯示小鼠ACPCs呈中間寬兩邊細(xì)長(zhǎng)的短梭形,其形態(tài)與間充質(zhì)細(xì)胞類似。流式細(xì)胞鑒定,CD29、CD73表達(dá)分別為（89.2±1.53）%和（81.1±0.84）%;CD90、CD105 分別為（24.3±1.11）%和（41.6±0.62）%;Notch-1表達(dá)為（12.0±1.05）%;CD31、CD44、CD45表達(dá)分別為低表達(dá)或不表達(dá)�？寺⌒纬蓪�(shí)驗(yàn)顯示小鼠ACPC... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?ＡＣＰＣｓ細(xì)胞形態(tài)

圖３．?ＡＣＰＣｓ克隆形成實(shí)驗(yàn)

?於??０Ｃ：＾５Ｓ＊?ｖ?ｆ?．?ｌ?？?｜?Ｔ？??Ｖ?１／?／．Ｊ?■：？■－？＇＜?９Ｊ?１＊?ｖ?ＩｖＶＵ?ｒ？ｒ？?Ｄ免?Ｌ．ｉｊ?ｌ?Ｕ）?５８轉(zhuǎn)…＊．．．ｌ?？ｌ?ｔ％．?ＩＮＯｌＧＭ－?ｌ??ｎ?■?ａ?ｎ?ｎｒ??ｎ?Ｉ］?｜?ｍ?ｎｉｌ??｜?／?｜?ｆｉ?｜？ｉ?Ｉ?１１??ｌｋＪ?＼?ｌ?＼?ｌ＼＼?ｌ＼＼??ｑ?Ｖ?ｉｓ５?？ｃ３?ｏ?Ｊ９＊?ｉａＪ?ｉ〇Ｊ?９?ｔｏ１?＞ｅ３?ｉｓ＊?ｏ?１３＇?？７?ｉ？５??圖２．?ＡＣＰＣｓ流式細(xì)胞鑒定。??３．克隆形成實(shí)驗(yàn)??在肉眼下觀察，可見(jiàn)在培養(yǎng)皿底部均有多個(gè)ＡＣＰＣｓ單細(xì)胞克隆形成。在倒置顯微鏡??下觀察，可見(jiàn)每個(gè)單細(xì)胞克隆是由多個(gè)形態(tài)類似的短梭形細(xì)胞構(gòu)成，克隆中心由于細(xì)??胞密度高，呈現(xiàn)鋪路石樣細(xì)胞分布（圖３）。??＿ｇｐ＿??■１??圖３．?ＡＣＰＣｓ克隆形成實(shí)驗(yàn)。??４．三系誘導(dǎo)??成營(yíng)誘導(dǎo)在肉眼下觀察茜素紅Ｓ染色，可見(jiàn)誘導(dǎo)組有大面積橙紅色染色區(qū)，非??誘導(dǎo)組無(wú)橙紅色染色區(qū)。在倒置顯微鏡下觀察茜素紅Ｓ染色，誘導(dǎo)組可見(jiàn)橙紅色染色??１２??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3561709