目的:本研究旨在通過利用外源性PTHrP作用于C57 BL/6小鼠生長板或生長板軟骨細胞,驗證PTHrP可通過旁分泌途徑調節(jié)生長板軟骨細胞中HDAC4的核內外穿梭進而調控軟骨細胞增殖。方法:1.C57BL/6小鼠脛骨生長板軟骨細胞的培養(yǎng)與鑒定。顯微鏡下對出生3-5天C57小鼠脛骨生長板進行觀察并定位,通過HE染色、番紅O染色觀察生長板組織中軟骨細胞的大致形態(tài)與分布特點;超凈工作臺分離生長板組織,采用胰酶、Ⅱ型膠原酶序貫消化法對小鼠生長板組織進行消化,提取生長板軟骨細胞;通過HE染色與番紅O染色對細胞大致形態(tài)觀察,免疫組化實驗對所培養(yǎng)軟骨細胞Col-Ⅱ進行檢測。2.PTHrP對生長板軟骨細胞增殖影響的實驗研究。將生長板軟骨細胞體外培養(yǎng)至第二代后隨機分為3個組別:高表達組,培養(yǎng)液中添加外源性PTHrP、Lipo2000;抑制表達組,使用Lipo2000運載PTHLH-homo-617質粒轉染軟骨細胞;空白對照組,培養(yǎng)液中添加Lipo2000。通過Rt-PCR實驗檢測軟骨細胞增殖相關指標如Sox-9、Col-Ⅱ、Agg、Ihh、Col-Ⅹ、Runx-2及MMP-13的基因表達水平變化;EdU... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數】：58 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
常用縮寫詞中英文對照表
前言
第一部分 C57BL/6 小鼠脛骨生長板軟骨細胞的培養(yǎng)與鑒定
    1 材料與方法
    2 結果
第二部分 PTHrP促進生長板軟骨細胞增殖的實驗研究
    1 PTHrP對生長板軟骨細胞增殖影響的實驗研究
        1.1 材料與方法
        1.2 結果
    2 PTHrP促進生長板軟骨細胞增殖相關機制的實驗研究
        1.1 材料與方法
        1.2 結果
討論
結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]軟骨組織工程[J]. 陳際達,曹文靈,王遠亮,蔡紹皙.  國外醫(yī)學.生物醫(yī)學工程分冊. 2001(01)



本文編號：3477465