本文關鍵詞：沉默肌腱干細胞TGIF1基因促進腱骨愈合的相關研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景及目的腱骨連接處是結締組織中的特殊形式,損傷之后很難形成纖維軟骨層,愈合能力較差。TGFβ在不同的階段通過不同的信號通路可產生雙向作用(成肌腱或成軟骨)。研究顯示TGIF1可抑制TGFβ通路下游軟骨基因的表達。肌腱干細胞作為新發(fā)現的干細胞,具有更強多向分化能力。本研究以肌腱干細胞為種子細胞,探討沉默肌腱干細胞中轉錄生長因子影響因子1(TGIF1)對腱骨損傷的促進作用。方法1從SD大鼠跟腱中分離、培養(yǎng)肌腱干細胞,并對其進行鑒定,進行成骨、成軟骨及成脂誘導,觀察肌腱來源干細胞的克隆、增殖能力及多向分化的能力。2利用沉默或過表達TGIF1基因的肌腱干細胞進行成軟骨誘導,觀察各組成軟骨分化的能力。在成軟骨誘導后的3天、7天及21天對細胞微團進行定量PCR及Western blotting檢測,觀察軟骨及肌腱相關標記基因的表達情況。3將64只成年SD大鼠隨機4組,分別為纖維蛋白+肌腱干細胞沉默TGIF1組,纖維蛋白+肌腱干細胞過表達TGIF1組,纖維蛋白+肌腱干細胞組和僅含纖維蛋白組。顯露并切斷大鼠岡上肌在肱骨大結節(jié)正常的插入點,去除插入點原有的纖維軟骨,在肌腱干細胞組注射1×106 TDSCs+纖維蛋白膠,僅含纖維蛋白組植入纖維蛋白膠,肌腱干細胞沉默TGIF1組注入1×106沉默TGIF1基因的肌腱干細胞+纖維蛋白膠,肌腱干細胞過表達TGIF1組植入1×106過表達TGIF1基因的肌腱干細胞+纖維蛋白膠。分別在術2周和4周取材進行組織學研究,評估腱骨平面的愈合情況。結果1大鼠跟腱分離的TDSCs經分離培養(yǎng)后具有較強的增殖能力,表面特異性抗原CD90陽性,CD73陽性,而CD34為陰性表達,多向分化實驗顯示TDSCs具有成骨、成軟骨及成脂肪分化的能力。2沉默或過表達肌腱干細胞TGIF1基因進行成軟骨分化,結果顯示沉默TGIF1基因的肌腱干細胞成軟骨能力增強,而過表達TGIF1基因的肌腱干細胞成軟骨能力減弱。3通過免疫共沉淀的方法發(fā)現TGIF1能夠結合Smad2,抑制Smad2的磷酸化。4纖維蛋白+肌腱干細胞沉默TGIF1組術后2周在腱骨界面之間出現軟骨細胞纖維軟骨,術后4周腱骨界面纖維軟骨較其他各組明顯,且可見較多排列有序的膠原纖維,而纖維蛋白+肌腱干細胞過表達TGIF1組和僅含纖維蛋白組中腱骨連接處瘢痕組織明顯。在肌腱干細胞組中含有少量的纖維軟骨和瘢痕組織。Western blotting檢測纖維蛋白+肌腱干細胞沉默TGIF1組蛋白裂解物中軟骨相關蛋白較其他組多。結論這個研究顯示沉默肌腱干細胞中TGIF1的表達可以促進腱骨連接面損傷的愈合。
【關鍵詞】：肌腱干細胞 轉錄生長因子影響因子-1 腱骨愈合
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R68
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 第一部分 肌腱干細胞的提取、鑒別及多向分化的相關研究12-22
• 2 材料與方法12-18
• 3 結果18-21
• 4 討論21-22
• 第二部分 調控肌腱干細胞TGIF1 表達對腱骨愈合的實驗研究22-42
• 2 材料與方法22-31
• 3 結果31-39
• 4 討論39-42
• 結論42
• 參考文獻42-49
• 附錄49-51
• 致謝51-52
• 綜述52-60
• 參考文獻56-60

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 秦朗;;運動員急性運動損傷調查及影響因素分析[J];現代預防醫(yī)學;2011年09期

  本文關鍵詞：沉默肌腱干細胞TGIF1基因促進腱骨愈合的相關研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：344862