發(fā)布時(shí)間：2021-10-15 14:04

　　目的:深低溫停循環(huán)（deep hypothermic circulatory arrest,DHCA）具有為術(shù)者提供清晰的術(shù)野、降低患者機(jī)體代謝率、延長腦部等重要組織器官缺血缺氧耐受時(shí)間等諸多特點(diǎn),是心臟外科手術(shù)中不可或缺的重要輔助技術(shù)。但DHCA神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥仍然是深低溫停循環(huán)術(shù)后最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一,影響患者的預(yù)后甚至危及生命。miR-494與腦缺血、神經(jīng)退行性病變、腦腫瘤、脊髓病變等疾病密切相關(guān),通過調(diào)節(jié)多種下游靶點(diǎn)的表達(dá),對細(xì)胞的增殖、分化、遷移以及凋亡發(fā)揮重要的調(diào)控作用。本研究通過構(gòu)建大鼠深低溫停循環(huán)模型,探討miR-494在DHCA后海馬組織中的變化及在抵抗DHCA后腦損傷中可能的保護(hù)作用。方法:80只SD大鼠隨機(jī)分為5組,每組16只。假手術(shù)組（Sham）:術(shù)前5天側(cè)腦室注射10μl PBS液,5天后行體外循環(huán)2小時(shí)不降溫停循環(huán);深低溫停循環(huán)組（DHCA）:術(shù)前5天側(cè)腦室注射10μl PBS液,5天后行DHCA手術(shù);上調(diào)miR-494后深低溫停循環(huán)組（AgomiR-494）:術(shù)前5天側(cè)腦室注射10μl AgomiR-494慢病毒載體,5天后行DHCA手術(shù);下調(diào)miR-494后... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

側(cè)腦室注射示意圖

圖 2 體外循環(huán)插管及管路圖A：左側(cè)股動(dòng)脈插管，B：右側(cè)頸外靜脈及氣管插管，C：體外循環(huán)管道整體示意圖動(dòng)靜脈端置管小心與體外循環(huán)管道連接，排氣并檢查管道及各接口處誤后，膜肺進(jìn)氣端連接氧氣，開始轉(zhuǎn)機(jī)，溫度探頭潤滑后置入肛門監(jiān)測體免插入過深造成腸道破裂出血。起始流量 160ml/kg/min，使用冰袋物理降溫水箱等方式逐漸降溫，降溫時(shí)間應(yīng)至少大于 30 分鐘，隨著溫度的降低小流量，隨心率的降低逐漸減少呼吸機(jī)輔助次數(shù)，當(dāng)溫度達(dá)到 18℃時(shí)停，保持體外循環(huán)管道血液自循環(huán)，防止膜肺產(chǎn)生血栓。此時(shí)監(jiān)護(hù)儀提示0mmHg，心率<50 次/分，心率血壓雖然未完全達(dá)到零，但難以提供充分供給。維持體溫 18℃停循環(huán) 60 分鐘后，開始轉(zhuǎn)流、復(fù)溫，給予適當(dāng)?shù)?5氫鈉注射液糾正酸中毒及呋塞米利尿，使用 100W 燈泡及變溫水箱緩慢復(fù)溫時(shí)間應(yīng)至少大于 30 分鐘，復(fù)溫時(shí)逐漸增加流量，并隨心率的增加而調(diào)機(jī)輔助次數(shù)。當(dāng)體溫達(dá)到 34℃時(shí)，應(yīng)維持心率在 300 次/分以上，平均動(dòng)

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3 結(jié)果3.1 側(cè)腦室注射后大鼠腦組織熒光由于本實(shí)驗(yàn)使用的慢病毒載體中嵌有 GFP 綠色熒光蛋白，故成功轉(zhuǎn)染后，在熒光顯微鏡下可以看到組織中發(fā)出綠色熒光。大鼠經(jīng)側(cè)腦室注射慢病毒載體，5 天后再次吸入異氟烷麻醉，斷頭法處死，于冰上分離出海馬組織，立即制作成冰凍切片，于熒光顯微鏡下觀察，可見海馬組織呈現(xiàn)出綠色熒光，說明慢病毒載體成功將目的基因轉(zhuǎn)染至大鼠海馬組織，通過側(cè)腦室注射的方法可以將攜帶AgomiR-494 及 AntagomiR-494 的慢病毒載體轉(zhuǎn)染至大鼠海馬組織。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Up-Regulation of Trem2 Inhibits Hippocampal Neuronal Apoptosis and Alleviates Oxidative Stress in Epilepsy via the PI3K/Akt Pathway in Mice[J]. Ai-Hua Liu,Min Chu,Yu-Ping Wang.  Neuroscience Bulletin. 2019(03)
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本文編號(hào)：3438103