發(fā)布時(shí)間：2021-10-11 10:49

　　目的:通過(guò)構(gòu)建成人心肌缺氧/復(fù)氧損傷模型,探討瑞芬太尼后處理對(duì)成人心肌缺氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)效應(yīng),進(jìn)一步觀(guān)察三種阿片受體（μ、δ、κ）在此效應(yīng)中的作用,以及此效應(yīng)是否通過(guò)細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2）信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo),調(diào)控水通道蛋白-4（aquaporin-4,AQP-4）表達(dá),減輕心肌水腫程度而實(shí)現(xiàn)。方法:通過(guò)剪取完整成人右心耳肌小梁,建立心肌缺氧/復(fù)氧損傷模型,將66條肌小梁隨機(jī)分為11組,正常對(duì)照組（C組）:肌小梁以復(fù)氧液灌注210 min,未行缺氧/復(fù)氧;缺氧/復(fù)氧組（HR組）:肌小梁缺氧90 min/復(fù)氧120 min;10^-11、10^-10或10^-99 M瑞芬太尼后處理組（LRP、MRP或HRP組）:肌小梁缺氧90 min/復(fù)氧120 min,在缺氧結(jié)束前10 min開(kāi)始分別灌注10^-11、10^-10或10^-99 M瑞芬太尼至復(fù)氧開(kāi)始后10 min停止;μ、δ或κ受體拮抗... 

【文章來(lái)源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

右心耳肌小梁結(jié)構(gòu)網(wǎng)

10材料與方法1材料1.1實(shí)驗(yàn)標(biāo)本經(jīng)福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院臨床研究倫理審查委員會(huì)審批及患者知情同意，取成年心臟瓣膜置換患者的右心耳組織（約10×6mm），置于含預(yù)冷氧合改良臺(tái)式液的密閉瓶中，10分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。在顯微外科顯微鏡下，將整塊右心耳組織解剖出合適獨(dú)立的肌小梁(長(zhǎng)度≥3mm,直徑≤1mm)用于實(shí)驗(yàn)，每個(gè)右心耳組織可取2~3條符合要求的肌小梁。解剖操作時(shí)間控制在10分鐘內(nèi)。組織入選標(biāo)準(zhǔn)：成人患者體外循環(huán)下瓣膜置換手術(shù)的右心耳標(biāo)本。組織排除標(biāo)準(zhǔn)：患者出現(xiàn)病理生理改變包括房性心律失常和（或）服用抗心律失常藥物、右心室心力衰竭、糖尿病和（或）服用降血糖藥物。圖1右心耳肌小梁結(jié)構(gòu)網(wǎng)圖2心臟手術(shù)中剪取的右心耳組織1.2主要試劑試劑廠(chǎng)家品牌

162方法2.1建立心肌缺氧/復(fù)氧損傷模型依據(jù)Walker等[17]人的操作技術(shù)方法,將符合實(shí)驗(yàn)要求的肌小梁兩端心房壁楔形區(qū)域均用7/0縫合絲線(xiàn)結(jié)扎，其中一端接張力換能器，另一端接水浴槽底部固定桿，連接好的肌小梁垂直懸吊在37℃恒溫水浴槽中，調(diào)零后，無(wú)牽拉置放30min。肌小梁一旦懸掛，通過(guò)二塊鉑電極板，給予肌條連續(xù)方波電刺激(刺激頻率1Hz,刺激持續(xù)時(shí)間5ms,刺激強(qiáng)度為120%閾刺激)。穩(wěn)定期：隨后施加張力前負(fù)荷，從0g負(fù)荷開(kāi)始，每5min增加0.05g的前負(fù)荷，肌條也隨之被拉長(zhǎng)至一定距離，至獲得最大發(fā)展張力時(shí)停止?fàn)坷�，穩(wěn)定30~60min,此時(shí)為穩(wěn)定的最適前負(fù)荷。然后開(kāi)始缺氧/復(fù)氧處理。缺氧期：處理時(shí)間90min,缺氧灌注液持續(xù)孵育肌小梁，以缺氧氣體（95%N2+5%CO2）持續(xù)飽和，電刺激頻率改為4Hz,其他參數(shù)不變。復(fù)氧期：處理時(shí)間120min,復(fù)氧灌注液持續(xù)孵育肌小梁，以復(fù)氧氣體（95%O2+5%CO2）持續(xù)飽和，電刺激參數(shù)與穩(wěn)定期相同。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，測(cè)量肌小梁的長(zhǎng)度（Length）及重量(Mass)，并計(jì)算肌小梁的橫截面積（cross-sectionalarea,CSA），如CSA＞1mm2則排除研究。CSA計(jì)算公式：其中Mass、Length分別為肌小梁質(zhì)量、長(zhǎng)度；ρ為肌小梁密度，評(píng)估為1mg/mm3。圖3肌小梁缺氧/復(fù)氧損傷模型簡(jiǎn)圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Post-conditioning with gradually increased reperfusion provides better cardioprotection in rats[J]. Guo-ming Zhang,Yu Wang,Tian-de Li,Xiao-yan Li,Shao-ping Su,Yuan-yuan Sun,Xiu-hua Liu.  World Journal of Emergency Medicine. 2014(02)
[2]脊髓內(nèi)MAPK-ERK通路在心肌缺血再灌注損傷中的作用[J]. 蔣萌,王霖,蔣海河.  中國(guó)當(dāng)代兒科雜志. 2013(05)



本文編號(hào)：3430359