骨肉瘤是一種最常見的骨原發(fā)惡性腫瘤,其惡性程度較高,常見于兒童和青少年,其次為老年人（雙峰現(xiàn)象）,容易發(fā)生轉(zhuǎn)移,最常見部位為肺部,而肺轉(zhuǎn)移往往是骨肉瘤治療失敗的主要原因,其5年總生存率不足20%。目前,骨肉瘤肺轉(zhuǎn)移的機制尚不清楚,而免疫療法等新穎治療方式仍然存在一定挑戰(zhàn)。越來越多的腫瘤免疫學研究聚焦于趨化因子。一方面,趨化因子可以激活和增強各類免疫細胞發(fā)生遷移,另外一方面,趨化因子可增強腫瘤細胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。趨化因子12（CXCL12）在腫瘤發(fā)生與發(fā)展過程中存在兩面性,即CXCL12在趨化因子梯度驅(qū)動下既參與腫瘤轉(zhuǎn)移又參與T細胞歸巢的過程。此外,CXCL12-CXCR4生物軸與骨肉瘤患者預(yù)后之間的關(guān)系仍存在爭議。第一部分探討CXCL12-CXCR4生物軸在骨肉瘤中的作用,我們發(fā)現(xiàn)骨肉瘤通過DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1（DNMT1）甲基化調(diào)控CXCL12表達,進而影響腫瘤細胞增殖、遷移和轉(zhuǎn)移。第二部分探討骨肉瘤內(nèi)CXCL12的異常表達對腫瘤內(nèi)免疫細胞的影響以及首次聯(lián)合CXCL12和CXCR4兩個分子探討該生物軸與骨肉瘤患者預(yù)后的相關(guān)性。流式技術(shù)和組化結(jié)果表明腫瘤內(nèi)CXCL12的濃度與淋巴細胞的... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：143 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

Westernblot檢測pErk1/2和pAkt的變化，明確CXCL12對骨肉瘤細胞增殖CXCR4U2OSAK7M2B

浙江大學博士學位論文第一部分CXCL12-CXCR4生物軸在骨肉瘤中的作用20圖1.1Westernblot檢測CXCR4和CXCR7在骨肉瘤細胞和正常成骨細胞中表達水平（A）和半定量分析（B）。圖1.2Westernblot檢測pErk1/2和pAkt的變化，明確CXCL12對骨肉瘤細胞增殖的影響。CXCR4陽性的人U2OS細胞（A）和小鼠K7M2細胞（B）給與重組hCXCL12處理，并且利用shRNA敲降CXCR4阻斷CXCL12-CXCR4軸。

浙江大學博士學位論文第一部分CXCL12-CXCR4生物軸在骨肉瘤中的作用21圖1.3增殖試驗表明CXCL12可促進U2OS（A）和K7M2細胞生長（B），而CXCR4敲降削弱這些影響。（數(shù)據(jù)以平均值加減標準誤顯示，*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,和****P<0.0001）1.3.2CXCL12-CXCR4軸參與骨肉瘤的遷移和轉(zhuǎn)移腫瘤轉(zhuǎn)移是骨肉瘤進展中的關(guān)鍵事件，可直接導致患者死亡。我們進一步確定CXCL12是否可以通過CXCR4途徑促進骨肉瘤細胞的遷移。Transwell分析顯示重組CXCL12可促進U2OS和K7M2細胞遷移，CXCR4敲降可抑制CXCL12誘導的細胞遷移作用，表明CXCL12以CXCR4的方式促進骨肉瘤細胞遷移（見圖1.4）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Effect of cytotoxic T-lymphocyte antigen-4,TNF-alpha polymorphisms on osteosarcoma: evidences from a meta-analysis[J]. Jianwei Liu,Junli Wang,Weiping Jiang,Yujin Tang.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(06)
[2]唑來膦酸對骨肉瘤患者PBMCs來源γδT細胞抗骨肉瘤作用的影響[J]. 李朝旭,唐際存,孫凌凌,葉招明.  細胞與分子免疫學雜志. 2013(01)
[3]運用抗PD-L1抗體治療晚期癌癥患者的安全性與療效評價[J]. 姜孝新,Julie R.Brahmer,Scott S.Tykodi,Laura Q.M.Chow.  腫瘤藥學. 2012(03)
[4]CXCR4/SDF-1 axis is involved in lymph node metastasis of gastric carcinoma[J]. Bao-Cheng Zhao,Zhen-Jun Wang,Hua-Chong Ma,Jia-Gang Han,Bo Zhao,Department of General Surgery,Beijing Chaoyang Hospital,Capital Medical University,Beijing 100020,China Wei-Zheng Mao,Department of General Surgery,Qingdao Municipal Hospital,Qingdao University Medical College,Qingdao 266071,Shandong Province,China Hui-Min Xu,Department of General Surgery,Weifang People’s Hospital,Weifang 261041,Shangdong Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2011(19)



本文編號：3397148