鋅酞菁（ZnPc）作為第二代人工合成的光敏劑已經(jīng)廣泛應用到光動力治療之中。但由于鋅酞菁極易在水中析出沉淀而導致藥物輸送效率降低,進而降低了其誘導腫瘤光動力治療的效果。因此,我們利用新型嵌段聚合物聚乙二醇-聚煙酸酯（PEG-PMAN）載體搭載鋅酞菁,合成鋅酞菁納米顆粒,并利用MTS檢測,膜聯(lián)蛋白V（AnnexinV）-藻紅蛋白（PE）/7-氨基放線菌素D（7-aad）標記的流式細胞儀凋亡檢測等技術檢測納米化的鋅酞菁誘導光動力治療殺傷骨肉瘤效果。通過流式及蛋白免疫印跡等技術檢測檢測納米酞菁顆粒光動力治療介導的細胞周期改變,驗證其誘導骨肉瘤細胞凋亡的機制。同時通過動物實驗進一步驗證納米鋅酞菁顆粒光動力治療體內(nèi)腫瘤效果。我們結(jié)果表明,相比鋅酞菁單體,納米化的鋅酞菁能夠極大地加強對骨肉瘤的光動力殺傷效果,并通過促進了細胞G2/M期阻滯介導骨肉瘤細胞的凋亡。體內(nèi)實驗表明,納米酞菁顆粒無明顯的毒副作用,并顯著抑制了腫瘤的生長。該發(fā)現(xiàn)表明了新型嵌段聚合物聚乙二醇-聚煙酸酯搭載的酞菁納米顆粒具臨床應用的廣闊前景。 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?ＰＰＺ納米顆粒的結(jié)構示意圖、水溶液中的穩(wěn)定性和紅光光區(qū)的吸收光譜

以往的文獻表明，ＺｎＰｃ的吸收峰在６６０ｎｍ左右，其焚光強度與ＺｎＰｃ的含量??有關［１６］。我們應用細胞流式檢測的方法來明確ＰＰＺ與ＺｎＰｃ單體在細胞內(nèi)部吸收情??況（圖２Ａ和Ｂ）�？梢娂毎麅�(nèi)部ＰＰＺ攝取量隨著ＰＰＺ濃度及作用時間的上升而增??加，然而在ＺｎＰｃ單體作用組我們未見到顯著的細胞攝取，這體現(xiàn)了骨肉瘤細胞對??ＰＰＺ納米顆粒的高攝取性及細胞對ＰＰＺ納米顆粒的劑量相關性及時間相關性攝取。??我們進而通過熒光顯微鏡觀察細胞攝取藥物情況，結(jié)果與細胞流式檢測的相符。??兩者結(jié)果共同提示了?ＰＰＺ納米顆粒增強骨肉瘤細胞對ＺｎＰｃ的攝取。??Ａ?ＺｎＰｃ?ＰＰＺ??＾?＂?□?Ｃｏｎｔｒｏｌ?〇＿?□?Ｃｏｎｔｒｏｌ??〇?＿?ｊ?Ｃ?〇．２５ｕＭ?Ｉ?□?０．２５ｕＭ??Ｎ?！?０．５｜ｊＭ?ｊ?０．５ｍＭ??ｃ?？：?１?１ＭＭ?幺：，?二?１ｐＭ??〇?〇?，?２ｐＭ?Ｓ＇?２ｍＭ?Ｃ?＾ＰＢＳ?ＰＥ＾ＭＡＮ＾ＺｎＰｃ?ＰＰＺ??ｉ?由幽＿｜幽＿｜??－１０３?０?１０３?１０４?１０５?－１０３?０?１０３?１０４?１０５?｜?－?－?—??Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ?至■?｜＼?｜｜?一

在ＲＬ照射后下無論是ＺｎＰｃ單體或者是ＰＰＺ均產(chǎn)生了明顯的細胞殺傷效果??（Ｐ０．００１）。更引人關注的是，相比于ＺｎＰｃ單體或者是順鉑，ＰＰＺ介導的光動力??治療有著更為強大的細胞殺傷能力（Ｐ＜〇．〇〇ｌ）（圖３Ａ、Ｂ、Ｃ和Ｄ）。其對ＭＮＮＧ／ＨＯＳ、??Ｕ２０Ｓ、ＳＡ０Ｓ－２?及?ＭＧ－６３?半數(shù)致死量（ＩＣ５０）分別為?０．３６，?１．４６，?０．６４?和?０．９７ｐＭ。??而先前的實驗證明ＰＰＺ納米顆粒載體ＰＥＧ－ＰＭＡＮ對四種細胞系均無毒性，排除了??載體對實驗結(jié)果的影響［１３］。而ＰＰＺ光動力殺傷效果較ＺｎＰｃ單體提高的原因是ＺｎＰｃ??單體在溶液中大量結(jié)晶，影響了細胞對其的吸收攝取，這可以從ＺｎＰｃ單體組的顯??微鏡圖片中證明（圖３Ｅ）。??１１??


本文編號：3392134