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人尿源干細胞外泌體對退變髓核細胞生物學(xué)功能的影響

發(fā)布時間:2021-08-31 11:02
  背景:下腰痛(Low Back Pain)為現(xiàn)代社會中最常見疾患之一,對患者的生活造成了嚴重的影響。流行病學(xué)研究顯示,超過80%的人在其一生中出現(xiàn)過一次或多次下腰痛的經(jīng)歷,超過15%的人疼痛程度需要住院治療才能得到緩解。目前的病因?qū)W研究顯示超過40%的下腰痛來源于椎間盤退變(Intervertebral Disc Degeneration,IDD)的繼發(fā)病變。椎間盤退變是人體的一種自然衰老過程,但它可引起腰椎間盤突出癥、腰椎管狹窄癥、腰椎滑脫癥等疾病。椎間盤退變是多層面、緩慢進展的過程,其中由于退變椎間盤中髓核細胞(nucleus pulposus cells,NPCs)數(shù)量減少和活性降低而導(dǎo)致細胞外基質(zhì)合成減少是導(dǎo)致椎間盤退變的重要因素之一。因此,尋找減緩甚至逆轉(zhuǎn)椎間盤退變的方法,一直是該領(lǐng)域的研究熱點之一。間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有自我更新及多項分化潛能的成體干細胞。近年來有研究證明,可通過干細胞移植抑制髓核細胞退變及凋亡,并有研究報道間充質(zhì)干細胞可通過其分泌的外泌體(Exosome)調(diào)節(jié)NPCs中蛋白聚糖(ACAN)、Ⅱ型膠原(C... 

【文章來源】:青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】:45 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

人尿源干細胞外泌體對退變髓核細胞生物學(xué)功能的影響


倒置顯微鏡下(×100)觀察a接種后第5d可見3-5個類圓形細胞貼壁生長b接種后第10d,細胞生長增殖形成集落,達80-90%融合圖2WB檢測干細胞陽性標志物CD29、CD44、CD73和CD90呈高表達,未檢出干細胞陰性標志物CD34和CD45圖3倒置顯微鏡下(×200)觀察a經(jīng)3a3b3c

共聚焦顯微鏡,熒光,細胞核,紅色


青島大學(xué)碩士學(xué)位論文163.USC-Exos熒光標記及NPCs攝取USC-Exos結(jié)果圖5a激光共聚焦顯微鏡下(×60)DAPI染色的P6NPCs細胞核bPKH26紅色熒光標記的USC-ExoscP6NPCs攝取USC-Exos于胞內(nèi)4.繪制NPCs生長曲線經(jīng)USCs外泌體刺激后實驗組NPCs較對照組增殖速度變快。細胞在最初1d增殖速度均緩慢,在2d后增殖速度加快,3d時呈對數(shù)生長狀態(tài)。生長至第5d時,細胞密度已接近80%融合,細胞生長進入平臺期,細胞生長與衰亡接近動態(tài)平衡(圖5)。圖6CCK8法檢測兩組細胞不同時間點吸光度,以培養(yǎng)時間為橫坐標,以NPCs在A450nm波長下吸光度為縱坐標,繪制細胞生長曲線5a65b5c

細胞生長曲線,吸光度,細胞,時間點


青島大學(xué)碩士學(xué)位論文163.USC-Exos熒光標記及NPCs攝取USC-Exos結(jié)果圖5a激光共聚焦顯微鏡下(×60)DAPI染色的P6NPCs細胞核bPKH26紅色熒光標記的USC-ExoscP6NPCs攝取USC-Exos于胞內(nèi)4.繪制NPCs生長曲線經(jīng)USCs外泌體刺激后實驗組NPCs較對照組增殖速度變快。細胞在最初1d增殖速度均緩慢,在2d后增殖速度加快,3d時呈對數(shù)生長狀態(tài)。生長至第5d時,細胞密度已接近80%融合,細胞生長進入平臺期,細胞生長與衰亡接近動態(tài)平衡(圖5)。圖6CCK8法檢測兩組細胞不同時間點吸光度,以培養(yǎng)時間為橫坐標,以NPCs在A450nm波長下吸光度為縱坐標,繪制細胞生長曲線5a65b5c

【參考文獻】:
期刊論文
[1]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞來源外泌體對退變髓核細胞的影響[J]. 蔣長青,藍蔚仁,李海音,路康,李長青.  中國脊柱脊髓雜志. 2019(02)
[2]人尿源干細胞及其在骨組織工程中應(yīng)用的研究進展[J]. 高鵬,姜大朋,李昭鑄.  中華外科雜志. 2016 (04)

碩士論文
[1]非接觸式共培養(yǎng)條件下兩種間充質(zhì)干細胞對同源退變髓核細胞生物學(xué)影響的比較研究[D]. 姜剛強.第二軍醫(yī)大學(xué) 2014



本文編號:3374776

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