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Tau蛋白的過磷酸化修飾在臂叢神經(jīng)損傷后神經(jīng)元逆行性退變中的研究

發(fā)布時間:2021-08-30 21:45
  目的:臂叢神經(jīng)根性撕脫傷是一種嚴重的外周神經(jīng)損傷,會造成上肢功能的嚴重受損,健側頸7移位術為患者帶來了希望,為了進一步提高手術療效,需要攻克的一個難題是切斷頸7神經(jīng)后造成的脊髓中樞神經(jīng)元的逆行性退變(Neuronal Retrograde Degeneration,NRD)。在眾多中樞神經(jīng)系統(tǒng)退變的疾病中,均有Tau蛋白的異常磷酸化發(fā)生,而外周神經(jīng)損傷后的中樞神經(jīng)逆行性退變的發(fā)生過程中是否有Tau蛋白的過度磷酸化尚未報道。本文旨在研究Tau蛋白的過磷酸化修飾在該退變中的變化。方法:構造SD大鼠頸7神經(jīng)切斷的模型,飼養(yǎng)至2周、4周、6周及8周后取大鼠頸7節(jié)段的脊髓組織,通過HE染色,流式細胞學,Western Blot,免疫組化來分析神經(jīng)細胞的凋亡情況及Tau蛋白的磷酸化水平;給予氯化鋰藥物試圖阻斷神經(jīng)元凋亡的中間過程,相同的方法分析干預后的神經(jīng)細胞的凋亡情況及Tau蛋白的磷酸化水平,比較差異。結果:HE染色及流式細胞學檢測顯示2周時的細胞凋亡程度小于4周時的凋亡程度;Western Blot及免疫組化結果提示隨著周數(shù)的增加,總Tau蛋白的量因頸7神經(jīng)的切斷而下降,磷酸化的Tau蛋白的量... 

【文章來源】:蘇州大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:56 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

Tau蛋白的過磷酸化修飾在臂叢神經(jīng)損傷后神經(jīng)元逆行性退變中的研究


圖1.?2周時切斷雙側臂叢頸7神經(jīng)后的大鼠C7節(jié)段脊髓組織的神經(jīng)元細胞的形??態(tài)變化

細胞分布,臂叢,神經(jīng)元,脊髓


結果?Tau蛋白的過磷酸化修飾在臂叢神經(jīng)損傷后神經(jīng)元逆行性退變中的研究??星號表示萎縮退變的神經(jīng)元細胞。??在4周時,假手術組的切片與2周時的組織無明顯病理學變化,神經(jīng)元細胞的胞??體與突起之間聯(lián)系緊密;切斷組的脊髓中樞神經(jīng)元細胞發(fā)生了同2周切斷組相似的明??顯退變,與2周切斷組組織有差別的是,4周切斷組切片內的萎縮神經(jīng)元細胞周圍的??空泡化比率及空泡范圍都較前者小,周圍的膠質瘢痕化程度高,組織結構排列紊亂,??局限性致密度增高;氯化鋰藥物干預組的頸髓組織的退變程度較假手術組重,但比切??斷組輕,組織細胞分布特點同2周干預組,但細胞分布密度較2周干預組低(圖2)。??藝_?_??瞧??'■二.入,…:??干預組??干預??100X?400?X??圖2.?4周時切斷雙側臂叢頸7神經(jīng)后的大鼠C7節(jié)段脊髓組織的神經(jīng)元細胞的形??態(tài)變化。在放大倍數(shù)為400x的圖像中,紅色箭頭表示正常形態(tài)的神經(jīng)元細胞,紅色??星號表示萎縮退變的神經(jīng)元細胞。??總結2周及4周的HE染色結果,兩批次的假手術組的頸髓神經(jīng)元細胞均無明顯??的自發(fā)性退變情況發(fā)生,為正常生理狀態(tài)下的生長發(fā)育過程,能夠在實驗中起到良好??的參照作用。兩批次的切斷雙側頸7神經(jīng)組,大鼠的頸髓組織均發(fā)生了形態(tài)學上可見??的神經(jīng)元細胞退變,證明切斷周圍神經(jīng)后會發(fā)生中樞神經(jīng)元的逆行性退變;4周組的??膠質細胞增生替代原生神經(jīng)元細胞退變后的組織架構的現(xiàn)象在2周組的頸髓組織內??表現(xiàn)不明顯,既與退變的嚴重程度有關,也與生理上發(fā)生膠質瘢痕化過程的時間有關。??兩批次的雙側頸7神經(jīng)切斷組大鼠在經(jīng)氯化鋰藥物干預后,頸髓組織的退變程度都較??12??

凋亡,脊髓,細胞,組織細胞


組的神經(jīng)元退變程度發(fā)生了好轉,但相對假手術組而言并沒有發(fā)生退變的停??滯,即氯化鋰能夠改善退變程度,但不能逆轉退變的方向,且隨著時間的推移,退變??程度亦逐漸增加。??2.流式細胞學結果??在對頸髓內中樞神經(jīng)元細胞的退變研宄中,我們使用流式細胞學檢測來分析大鼠??臂叢頸7神經(jīng)切斷術后的脊髓神經(jīng)元細胞的凋亡量。結果顯示:2周時,假手術組的??組織細胞凋亡率為5.45±0.28%,切斷組的組織細胞凋亡率為10.76±0.23%,干預組的??組織細胞凋亡率為6.58±0.26%?(表1,圖3)。???表1.各組大鼠2周時C7脊髓神經(jīng)細胞凋亡情況(%,Mean土SD)??m\?M?C7脊髓神經(jīng)細胞凋亡占比??假手術組?6?5.45士?0.28??切斷組?6?10.76±0.23?*??干預組?6?6.58±0.26?#??注:與假手術組比較,*?P<〇.?〇5;與切斷組比較,#?P<〇.?05??K002.P1?TutwJ3W.Pl?了敘..》5,??VL?|?im?Ut?UR?UL?UR??I?9.99?rfb.34?0.17?卿?B?0.14??it?1?次??1'^i??tk?A?,|?A?I??:隊―麵廠―??94.46?>16?j?td.m?win?6.?s??^?^?^?-i*?W?W?m?^??獅?r?tc?-a?ntc-A?Fire--a??ABC??圖3.2周時大鼠C7節(jié)段脊髓組織內細胞的凋亡率。(A)假手術組;(B)切斷??組;(C)干預組。??4周時,假手術組的組織細胞凋亡率為5.39±0.28%,切斷組的組織

【參考文獻】:
期刊論文
[1]利多卡因對運動及感覺神經(jīng)元保護作用的實驗研究[J]. 糜菁熠,徐建光,徐文東,林森,李繼峰.  中華手外科雜志. 2004(04)



本文編號:3373551

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