骨肉瘤是兒童和青少年最常見的原發(fā)性惡性骨腫瘤,具有早期肺轉(zhuǎn)移、高復(fù)發(fā)率等特點。采用手術(shù)、新輔助化療等綜合治療方案后,療效有了顯著提高,但是仍有30%-50%的局部骨肉瘤終將復(fù)發(fā)；對于復(fù)發(fā)性和轉(zhuǎn)移性骨肉瘤,目前尚無有效方法,療效極差。盡管新輔助化療結(jié)合手術(shù)已可將骨肉瘤患者的5年生存率提高到60-80%,但近30年來患者的生存率始終沒有進(jìn)一步的提高。同時,高劑量的化療藥物如甲氨蝶呤、阿霉素、順鉑、異環(huán)磷酰胺等帶來的副作用很大。因此,尋找一種新型有效、安全的治療方法是目前亟需解決的關(guān)鍵問題。雷公藤紅素是傳統(tǒng)中藥雷公藤單體之一,三萜類化合物,具有多重生物藥理活性,不僅能夠抑制免疫反應(yīng)和抗炎癥,近些年來還發(fā)現(xiàn)其具有抗腫瘤的活性。同時關(guān)于雷公藤紅素抗腫瘤的機制眾所紛紜,包括NF-κB、HSP90、蛋白酶體、MAPK、STAT3等。盡管這些分子靶點都在雷公藤紅素發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)中起到不同程度的作用,但是至今仍不清楚哪一個或哪幾個是其直接或主要靶點。在本次研究中,我們發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素通過引起腫瘤細(xì)胞G2/M期阻滯而對骨肉瘤有較強的抑制增殖作用。同時雷公藤紅素能激活caspase-3,-8和-9,通過內(nèi)外源... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

平板克隆實驗 .

圖2.11調(diào)亡自唾抑制剖共同存在時的細(xì)胞增殖情況2.4.2.5調(diào)亡和自嗟的關(guān)系很多研究已經(jīng)闡明了凋亡和自唾在不同細(xì)胞不同病理條件下有著復(fù)雜的關(guān)系，可以互相促進(jìn)、互相抑制等。因此，我們研究了在雷公藤紅素對骨肉瘤細(xì)胞作用中調(diào)亡和自嗟的關(guān)系。首先我們先探究了抑制調(diào)亡對自唾的影響，如圖2.12所示，當(dāng)用z-VAD-fmk將雷公藤紅素引起的調(diào)亡抑制時，被口丫唆橙染色的酸性自嗟小體明顯增多，蛋白水平也顯示抑制凋亡后LC3B蛋白明顯增強（圖2.14),說明當(dāng)調(diào)亡被抑制時，部分細(xì)胞將轉(zhuǎn)為自嗟性死亡。接下來，我們探究了抑制自嗟對調(diào)亡的影響，如圖2.13所示，當(dāng)用3-MA將自嗟抑制時，調(diào)亡也被一定程度抑制，蛋白水平上抑制自唆后，原本被雷公藤紅素激活的caspase-3和PARP活性有所下降(圖2.14);另外加入3-MA后，雷公藤紅素誘導(dǎo)的LC3B蛋白明顯下調(diào)，這也說明3-MA作為自唆抑制劍的有效性。以上結(jié)果表明了雷公藤紅素誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞產(chǎn)生

圖1雷公藤紅素發(fā)揮抗腫瘤作用中的三條主要機制（來自Liu，201 157 )望綜上所述，本篇綜述初步闡明了雷公藤紅素能夠通過調(diào)控多條重要的信號路而發(fā)揮對腫瘤細(xì)胞增殖抑制、周期阻滯、誘導(dǎo)凋亡和自噬、抑制轉(zhuǎn)移和成等作用，具有巨大的潛在治療價值。在諸多分子靶點中，雷公藤紅素對I復(fù)合物及轉(zhuǎn)錄因子NF-kB家族的活性抑制似乎是更為核心的作用機制，目只有該機制能較為完整地解釋其抗腫瘤的效應(yīng)及機理。然而，迄今為止，對雷公藤紅素系統(tǒng)性人體臨床試驗的開展；同時不少研究認(rèn)為雷公藤紅素


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