目的:骨肉瘤是一類嚴重危害青少年生命和健康的疾病,近20年其五年生存率未見提高,肺轉移是其致死的首要原因,一旦發(fā)生,其五年生存率將低于30%。因此,尋找有效控制骨肉瘤生長和轉移的治療靶點是骨肉瘤治療中亟需解決的問題之一。單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1,又名CCL2）的表達與骨肉瘤惡性行為相關。探索CCL2對骨肉瘤增殖轉移的作用,特別是肺轉移中的作用和機制,有助于為控制骨肉瘤進展提供新的治療策略。本課題主要從以下幾個方面進行研究:（1）分析CCL2在骨肉瘤中的表達情況,及其與肺轉移的相關性;（2）探索CCL2對骨肉瘤增殖和轉移能力的調(diào)控作用及機制;（3）CCL2對骨肉瘤極化巨噬細胞M1/M2表型的影響。方法:在不同肺轉移潛能的骨肉瘤細胞株、動物和臨床標本上用RTPCR、western-blot及免疫組化檢測CCL2的表達,分析其與骨肉瘤及其肺轉移的相關性;構建CCL2穩(wěn)定干擾的骨肉瘤細胞株,采用CCK-8檢測增殖、劃痕檢測細胞遷移、流式細胞儀檢測細胞周期和凋亡、Transwell檢測細胞侵襲改變等;同時將CCL2 RNA干擾的骨肉瘤細胞株及其對照組與巨噬細胞共培養(yǎng),采用RT-PCR檢測... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

腫瘤微環(huán)境募集巨噬細胞并影響其極化

R 檢測 CCL2 mRNA 在骨肉瘤細胞株中的表達（lot 檢測 CCL2 蛋白在骨肉瘤細胞系中的表達t 結果可見骨肉瘤細胞株中 CCL2 蛋白的表達-E4 (p<0.05; p<0.001)；且在高肺轉移潛能的2 的表達高于相應低肺轉移性的骨肉瘤細胞株層面驗證了前面的結果。-blot 檢測 CCL2 mRNA 在骨肉瘤細胞株中的表達

圖 1.1 RT-PCR 檢測 CCL2 mRNA 在骨肉瘤細胞株中的表達（**: p<0.001）1.3.1.2 Western-blot 檢測 CCL2 蛋白在骨肉瘤細胞系中的表達情況Western-blot 結果可見骨肉瘤細胞株中 CCL2 蛋白的表達明顯高于正常成骨細胞株 EC3T3-E4 (p<0.05; p<0.001)；且在高肺轉移潛能的細胞株 LM8 和CCH-OS-D CCL2 的表達高于相應低肺轉移性的骨肉瘤細胞株(p<0.05;p<0.001)。從蛋白層面驗證了前面的結果。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]腫瘤相關巨噬細胞:在腫瘤演進中的作用及潛在抗腫瘤靶點[J]. 董蓉,袁夢,應美丹,曹戟,楊波.  藥學進展. 2015(10)
[2]腫瘤微環(huán)境對骨肉瘤發(fā)生發(fā)展的影響[J]. 韓修國,湯亭亭.  國際骨科學雜志. 2015(03)
[3]骨肉瘤基因治療靶點研究的新進展[J]. 宋春雨,曲國蕃.  實用腫瘤學雜志. 2014 (04)
[4]骨肉瘤肺轉移相關基因的最新研究進展[J]. 湯國慶,燕太強,郭衛(wèi),楊榮利,彭長亮,趙會.  中國骨腫瘤骨病. 2010 (04)



本文編號：3327951