[目的]鎂合金被視為有應(yīng)用前景的骨科植入材料,而且其植入后釋放出的鎂離子具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用。本研究旨在檢測硫酸鎂對巨噬細胞極化和炎性細胞因子釋放的作用,并進一步研究這種調(diào)節(jié)作用對骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）軟骨分化的影響,以及對軟骨細胞增殖、遷移等功能的影響。我們希望我們的研究結(jié)果能夠為鎂合金在骨科的臨床應(yīng)用提供切實的理論基礎(chǔ)。[方法]首先,我們用脂多糖（LPS）和干擾素-γ（IFN-γ）誘導(dǎo)巨噬細胞的M1型分化,并用白介素-4（IL-4）誘導(dǎo)巨噬細胞向M2型分化,采用不同濃度的硫酸鎂作用于誘導(dǎo)分化過程中的巨噬細胞,通過流式細胞技術(shù)檢測硫酸鎂對巨噬細胞極化的影響。同時,我們通過ELISA和RT-qPCR檢測硫酸鎂影響巨噬細胞極化時,對其炎性細胞因子釋放的影響。然后,我們將M1型極化的巨噬細胞培養(yǎng)基上清液加入到軟骨誘導(dǎo)液中,通過micromass法培養(yǎng)hBMSCs得到細胞微球,對其進行組織學(xué)染色、糖胺聚糖（GAG）定量以及成軟骨相關(guān)基因表達的檢測,評價巨噬細胞釋放的炎性細胞因子對hBMSCs軟骨分化的影響。同時,通過上述方法我們檢測硫酸鎂調(diào)節(jié)的巨噬細胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)對hBMSCs軟... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

硫酸鎂對巨噬細胞LDH釋放的影響

圖 1.2 硫酸鎂對未極化的巨噬細胞表型的影響。圖 1.2 Effects of magnesium sulfate on the polarization of non-activated macrophages.（A）巨噬細胞 CCR7（代表 M1 型細胞）表達的流式柱狀圖結(jié)果。（B）巨噬細胞 CD206（代表 M2 型細胞）表達的流式柱狀圖結(jié)果。（C）3 次平行試驗得出的巨噬細胞 CCR7 和CD206 表達陽性率的統(tǒng)計結(jié)果。在 LPS 和 IFN-γ 刺激 1 天后，巨噬細胞的 CCR7 和 CD206 表達陽性率均大幅增加（圖 1.3）。有趣的是，同時采用 5mM 硫酸鎂處理細胞卻可以抑制 LPS 和IFN-γ 的作用，表現(xiàn)在 CCR7 陽性率出現(xiàn)明顯下降而 CD206 陽性率未出現(xiàn)明顯改變（圖 1.3）。硫酸鎂濃度增加到 20mM 同樣可以抑制巨噬細胞 CCR7 的表達，但其陽性率減少的比例低于 5 mM 和 10 mM 硫酸鎂。由于 LPS 和 IFN-γ 造成的細胞死亡和損傷（如圖 1.1 所示），和只用硫酸鎂處理而未加 LPS 和 IFN-γ 刺激

硫酸鎂對LPS和IFN-γ刺激的巨噬細胞表型的影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]New perspectives for articular cartilage repair treatment through tissue engineering: A contemporary review[J]. Giuseppe Musumeci,Paola Castrogiovanni,Rosalia Leonardi,Francesca Maria Trovato,Marta Anna Szychlinska,Angelo Di Giunta,Carla Loreto,Sergio Castorina.  World Journal of Orthopedics. 2014(02)
[2]Up-regulation of Cartilage Oligomeric Matrix Protein Gene Expression by Insulin-like Growth Factor-Ⅰ Revealed by Real Time Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction[J]. Hua TIAN~(1,2*) Ioannis STOGIANNIDIS~21 Department of Orthopaedics,Peking University Third Hospital,Beijing 100083,China;2 Coxa Hospital for Joint Replacement,Biokatu 6 b,Tampere 33101,Finland.  Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2006(10)

碩士論文
[1]DEC2和HIF-1α在骨肉瘤轉(zhuǎn)移侵襲中的作用及分子機制[D]. 胡涂.上海交通大學(xué) 2015



本文編號：3308931