發(fā)布時間：2021-07-05 23:48

　　目的:1.研究小劑量超短波治療對脊髓損傷（spinal cord injury,SCI）后早期A1型星形膠質(zhì)細胞分化的影響。2.小劑量超短波治療聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs）移植對脊髓損傷后大鼠損傷周圍星形膠質(zhì)細胞的影響方法:1.將60只SD大鼠隨機分成3組:假手術(shù)組（n=4）,對照組（n=28）,干預組（n=28）,假手術(shù)組僅暴露T10脊髓但不給予打擊;對照組,暴露T10節(jié)段脊髓后給予Allen’s打擊制備SCI模型,并不給予任何治療;干預組,給予Allen’s打擊致SCI,并在損傷后24h開始給予小劑量超短波（ultra shortwave,USW）治療,每日1次,每周5次,每次7min,直至取材前。SCI大鼠運動功能用Basso Beattie Bresnahan（BBB）評分進行評價,SCI大鼠取材后分別對受損脊髓組織進行固定、脫水沉糖、冰凍縱向切片,使用免疫熒光法檢測A1型星形膠質(zhì)細胞數(shù)、小膠質(zhì)細胞數(shù)、IBA-1/P65⁺細胞數(shù)及P65入核細胞數(shù)。2.將90... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

脊髓損傷大鼠造模示意圖（A-B）脊髓損傷模型打擊過（C）

中國醫(yī)科大學碩士學位論文42.2.2小劑量USW治療SCI術(shù)后第1天，給予干預組大鼠每天1次，每周5d的小劑量超短波干預，具體方法如下：每次治療前，先打開小功率USW治療儀。以損傷區(qū)域為基準，將2號電極（直徑為4cm）對置放于受損脊髓兩側(cè)，電極與大鼠皮膚保持2cm間隙（上海產(chǎn)五官超短波治療儀，功率為14W，波長7.37m,實際輸出功率約11W，每天7min）。2.2.3大鼠后肢的運動功能觀察為了保證實驗的穩(wěn)定性，所有SCI大鼠在造模前及造模后1d、3d、5d、7d，14d進行BBB運動功能行為學評估。BBB評分完全癱瘓的大鼠為0分，正常大鼠21分，SCI大鼠的功能情況介于兩者之間，每1只入組的大鼠觀察4min。圖1脊髓損傷大鼠造模示意圖（A-B）脊髓損傷模型打擊過（C）大鼠脊髓損傷后損傷區(qū)域圖2脊髓損傷大鼠小劑量USW治療(A)與行為學分析（B）（B）BBB行為學觀察

中國醫(yī)科大學碩士學位論文63結(jié)果3.1SCI早期大鼠運動功能評分對于BBB評分，所有的大鼠在造模前及假手術(shù)大鼠在術(shù)后蘇醒均為21分。造模后1d對照組、干預組BBB評分均處于0分，這證實SCI大鼠打擊模型建立的成功。隨著時間推移，對照組、干預組大鼠BBB評分逐漸上升，這代表SCI大鼠運動在不加任何干預的情況也可以恢復一部分；對照組、干預組自第3d起兩條曲線在逐漸向上的過程中，在同一時間點相比，干預組數(shù)值高于對照組，這代表從數(shù)值上看，干預組恢復程度快與對照組（圖2A）。大鼠SCI后14d時BBB評分，干預組高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01），這代表干預組SCI大鼠相比對照組表現(xiàn)出更好的運動功能恢復（圖3）。3.2IBA-1/P65免疫熒光IBA-1是小膠質(zhì)細胞的特異性標志物，在假手術(shù)組脊髓組織當中，小膠質(zhì)細胞呈現(xiàn)長梭狀。SCI后，小膠質(zhì)細胞及浸潤的巨噬細胞共同發(fā)揮免疫作用，吞噬過細胞的巨噬細胞呈現(xiàn)大而圓的多核狀。熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，SCI后對照組、干預組1-3d時脊髓組織周圍小膠質(zhì)細胞數(shù)量快速升高，SCI后1d兩組間浸潤細胞的巨噬細胞數(shù)量無明顯差異(p=0.4848)。SCI后3-7d兩組小膠質(zhì)細胞數(shù)量處于緩慢上升圖3SCI后各組運動功能恢復情況(A)SCI后早期組BBB行為學評分(B)SCI后14d時兩組BBB行為學評分**P<0.01


本文編號：3267076