研究目的骨折修復(fù)是一個多階段、復(fù)雜的過程,其最終目的是恢復(fù)功能和生物力學(xué)狀態(tài)。骨折可立即切斷局部血管,形成血腫,導(dǎo)致低氧分壓和局部缺氧。骨再生效果總是受到包括TNF-α、IL-6等在內(nèi)的高水平炎性細(xì)胞因子的影響。目前關(guān)于IL-6在骨生成中的功能作用的研究尚未達(dá)成一致結(jié)論。IL-6促進(jìn)成骨分化及骨折愈合和抑制成骨分化及抑制骨折愈合均有報道。欲探究IL-6對成骨細(xì)胞的雙向作用可能存在的機(jī)制。研究方法在本研究中,我們用200ng/ml BMP-2培養(yǎng)C2C12細(xì)胞,來誘導(dǎo)其為成骨細(xì)胞。在此基礎(chǔ)上分別把TNF-α或IL-6（濃度分別為0.1,1.0,10和100ng/ml）添加至含有BMP-2的培養(yǎng)基（200ng/ml）中培養(yǎng)C2C12細(xì)胞。在第7天進(jìn)行茜素紅S染色和ALP染色,并檢測ALP活性,Runx2 m RNA,Collagen1A2 m RNA和骨鈣蛋白的表達(dá)。將TNF-α組作為參照,來確定IL-6所發(fā)揮的效應(yīng)。為了檢測TNF-α和IL-6是否可逆轉(zhuǎn)BMP-2誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞分化。在使用BMP-2連續(xù)處理細(xì)胞7天后,除去BMP-2。同時,將濃度為100 ng/ml的TNF-α和IL-6... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：39 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度的TNF-α和IL-6對C2C12細(xì)胞增殖的影響

圖一:不同濃度的TNF-α和IL-6對C2C12細(xì)胞增殖的影響為了排除不同濃度的TNF-α和IL-6對C2C12增殖的影響,從而不影響實驗結(jié)果。正如CCK-8化驗表明,與對照組相比,C2C12細(xì)胞在TNF-α或IL-6濃度分別為0.1、1.10和100 ng/ml的情況下,細(xì)胞增殖/存活方面的差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(圖1A和1B)。實驗結(jié)果表明,不同濃度的TNF-α和IL-6對C2C12細(xì)胞的增殖/存活均沒有影響。


本文編號：3252662