丙酮酸激酶M2在骨肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)下調(diào)對(duì)巨噬細(xì)胞分化表型的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-06-13 13:23
目的:通過實(shí)驗(yàn)研究PKM2在骨肉瘤MG-63細(xì)胞的相對(duì)表達(dá)量來研究腫瘤微環(huán)境中THP-1來源單核細(xì)胞在誘導(dǎo)分化成巨噬細(xì)胞后其表型可能會(huì)發(fā)生的變化。初步探討骨肉瘤中PKM2和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞TAM之間的相關(guān)性。方法:1.通過siRNA干擾技術(shù)使骨肉瘤MG-63細(xì)胞的PKM2水平明顯降低。2.應(yīng)用qRT-PCR方法測(cè)定siRNA轉(zhuǎn)染后的MG-63細(xì)胞中PKM2的表達(dá)情況。3.Transwell小室構(gòu)建間接共培養(yǎng)模型,把低表達(dá)PKM2的骨肉瘤MG-63細(xì)胞與經(jīng)過PMA誘導(dǎo)處理后的THP-1細(xì)胞共同組成體外間接共培養(yǎng)模型,模擬腫瘤微環(huán)境。4.共培養(yǎng)結(jié)束后用流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定單核巨噬細(xì)胞中CD209+細(xì)胞的比例,根據(jù)結(jié)果來初步分析巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)后的分化表型。結(jié)果:1.為了研究腫瘤微環(huán)境中PKM2在骨肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)情況,實(shí)驗(yàn)通過設(shè)計(jì)、合成并且轉(zhuǎn)染siRNA,結(jié)果發(fā)現(xiàn)骨肉瘤MG-63細(xì)胞通過PKM2-siRNA均能使PKM2表達(dá)顯著降低,與無效序列組以及正常培養(yǎng)組相比,實(shí)驗(yàn)組中PKM2表達(dá)量的改變顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.實(shí)驗(yàn)組經(jīng)過PMA處理后與低表達(dá)PKM2的骨肉瘤MG-...
【文章來源】:南華大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】:50 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
qRT-PCR檢測(cè)siRNA干擾后骨肉瘤細(xì)胞MG-63中PKM2表達(dá)水平(*表示與無關(guān)序列組比較差異顯著;#表示與正常對(duì)照組比較差異顯)
圖 3 流式細(xì)胞檢測(cè)單核細(xì)胞表面的 CD209 受體相對(duì)比例(*表示與無關(guān)序列組比較差異顯著;#表示與正常對(duì)照組比較差異顯表 5 流式細(xì)胞檢測(cè)單核細(xì)胞表面受體 CD209 的相對(duì)比例ups 1 2 3 均數(shù)± KB 組 0.35 0.30 0.29 0.31 NC 組 0.22 0.31 0.28 0.27 si609 組 0.12 0.13 0.14 0.13示與無關(guān)序列組比較差異顯著;#表示與正常對(duì)照組比較差異顯)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]PMA誘導(dǎo)人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株THP-1細(xì)胞表面標(biāo)志物CD14和CD11b的表達(dá)[J]. 李曉琴,陳利榮. 山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(09)
[2]佛波酯聯(lián)合脂多糖誘導(dǎo)THP-1炎癥細(xì)胞模型的優(yōu)化及評(píng)價(jià)[J]. 鄒明月,席磊,饒菁菁,景一嫻,廖飛,楊曉蘭. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(11)
[3]流式細(xì)胞術(shù)分析PMA誘導(dǎo)THP-1分化為巨噬細(xì)胞的表型特征[J]. 彭卓穎,李想,叢喆,薛婧. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2017(10)
[4]PKM2基因沉默對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖及侵襲的影響[J]. 魏蘭,蘇敏,黃云秀,鐘昌莉,王念,季飛虎,陳婷梅. 腫瘤. 2015(09)
[5]EMT與骨肉瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究進(jìn)展[J]. 種陽,李國軍,張世謙,邵明,楊艷梅. 醫(yī)學(xué)綜述. 2015(12)
[6]骨肉瘤治療研究新進(jìn)展[J]. 黃承夸,韋文,陸吉利,韋西江,梁俊卿. 海南醫(yī)學(xué). 2014(21)
[7]骨肉瘤的治療進(jìn)展[J]. 黃成校,郭衛(wèi)春,郭哲. 醫(yī)學(xué)綜述. 2013(11)
[8]分化誘導(dǎo)劑PMA對(duì)THP-1源性巨噬細(xì)胞膜表面受體MD-2表達(dá)的影響[J]. 許建華,段光杰,朱江,徐小明,劉友生. 免疫學(xué)雜志. 2013(02)
[9]骨肉瘤的化療[J]. 牛曉輝,徐海榮. 中國癌癥雜志. 2010(02)
[10]我國骨肉瘤治療現(xiàn)狀及改進(jìn)建議—17家骨腫瘤治療中心1998~2008年資料分析[J]. 張清,徐萬鵬,郭衛(wèi),沈靖南,陶惠民,姚陽,畢文志,吳蘇稼,張偉濱,楊蘊(yùn),于秀淳,李建民,郭征,徐紹年,熊進(jìn),朱兵,韋興,杜心如,牛曉輝. 中國骨腫瘤骨病. 2009 (03)
本文編號(hào):3227598
【文章來源】:南華大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】:50 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
qRT-PCR檢測(cè)siRNA干擾后骨肉瘤細(xì)胞MG-63中PKM2表達(dá)水平(*表示與無關(guān)序列組比較差異顯著;#表示與正常對(duì)照組比較差異顯)
圖 3 流式細(xì)胞檢測(cè)單核細(xì)胞表面的 CD209 受體相對(duì)比例(*表示與無關(guān)序列組比較差異顯著;#表示與正常對(duì)照組比較差異顯表 5 流式細(xì)胞檢測(cè)單核細(xì)胞表面受體 CD209 的相對(duì)比例ups 1 2 3 均數(shù)± KB 組 0.35 0.30 0.29 0.31 NC 組 0.22 0.31 0.28 0.27 si609 組 0.12 0.13 0.14 0.13示與無關(guān)序列組比較差異顯著;#表示與正常對(duì)照組比較差異顯)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]PMA誘導(dǎo)人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株THP-1細(xì)胞表面標(biāo)志物CD14和CD11b的表達(dá)[J]. 李曉琴,陳利榮. 山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(09)
[2]佛波酯聯(lián)合脂多糖誘導(dǎo)THP-1炎癥細(xì)胞模型的優(yōu)化及評(píng)價(jià)[J]. 鄒明月,席磊,饒菁菁,景一嫻,廖飛,楊曉蘭. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(11)
[3]流式細(xì)胞術(shù)分析PMA誘導(dǎo)THP-1分化為巨噬細(xì)胞的表型特征[J]. 彭卓穎,李想,叢喆,薛婧. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2017(10)
[4]PKM2基因沉默對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖及侵襲的影響[J]. 魏蘭,蘇敏,黃云秀,鐘昌莉,王念,季飛虎,陳婷梅. 腫瘤. 2015(09)
[5]EMT與骨肉瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究進(jìn)展[J]. 種陽,李國軍,張世謙,邵明,楊艷梅. 醫(yī)學(xué)綜述. 2015(12)
[6]骨肉瘤治療研究新進(jìn)展[J]. 黃承夸,韋文,陸吉利,韋西江,梁俊卿. 海南醫(yī)學(xué). 2014(21)
[7]骨肉瘤的治療進(jìn)展[J]. 黃成校,郭衛(wèi)春,郭哲. 醫(yī)學(xué)綜述. 2013(11)
[8]分化誘導(dǎo)劑PMA對(duì)THP-1源性巨噬細(xì)胞膜表面受體MD-2表達(dá)的影響[J]. 許建華,段光杰,朱江,徐小明,劉友生. 免疫學(xué)雜志. 2013(02)
[9]骨肉瘤的化療[J]. 牛曉輝,徐海榮. 中國癌癥雜志. 2010(02)
[10]我國骨肉瘤治療現(xiàn)狀及改進(jìn)建議—17家骨腫瘤治療中心1998~2008年資料分析[J]. 張清,徐萬鵬,郭衛(wèi),沈靖南,陶惠民,姚陽,畢文志,吳蘇稼,張偉濱,楊蘊(yùn),于秀淳,李建民,郭征,徐紹年,熊進(jìn),朱兵,韋興,杜心如,牛曉輝. 中國骨腫瘤骨病. 2009 (03)
本文編號(hào):3227598
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