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丙酮酸激酶M2在骨肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)下調(diào)對(duì)巨噬細(xì)胞分化表型的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-06-13 13:23
  目的:通過實(shí)驗(yàn)研究PKM2在骨肉瘤MG-63細(xì)胞的相對(duì)表達(dá)量來研究腫瘤微環(huán)境中THP-1來源單核細(xì)胞在誘導(dǎo)分化成巨噬細(xì)胞后其表型可能會(huì)發(fā)生的變化。初步探討骨肉瘤中PKM2和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞TAM之間的相關(guān)性。方法:1.通過siRNA干擾技術(shù)使骨肉瘤MG-63細(xì)胞的PKM2水平明顯降低。2.應(yīng)用qRT-PCR方法測(cè)定siRNA轉(zhuǎn)染后的MG-63細(xì)胞中PKM2的表達(dá)情況。3.Transwell小室構(gòu)建間接共培養(yǎng)模型,把低表達(dá)PKM2的骨肉瘤MG-63細(xì)胞與經(jīng)過PMA誘導(dǎo)處理后的THP-1細(xì)胞共同組成體外間接共培養(yǎng)模型,模擬腫瘤微環(huán)境。4.共培養(yǎng)結(jié)束后用流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定單核巨噬細(xì)胞中CD209+細(xì)胞的比例,根據(jù)結(jié)果來初步分析巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)后的分化表型。結(jié)果:1.為了研究腫瘤微環(huán)境中PKM2在骨肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)情況,實(shí)驗(yàn)通過設(shè)計(jì)、合成并且轉(zhuǎn)染siRNA,結(jié)果發(fā)現(xiàn)骨肉瘤MG-63細(xì)胞通過PKM2-siRNA均能使PKM2表達(dá)顯著降低,與無效序列組以及正常培養(yǎng)組相比,實(shí)驗(yàn)組中PKM2表達(dá)量的改變顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.實(shí)驗(yàn)組經(jīng)過PMA處理后與低表達(dá)PKM2的骨肉瘤MG-... 

【文章來源】:南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】:50 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

丙酮酸激酶M2在骨肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)下調(diào)對(duì)巨噬細(xì)胞分化表型的影響


qRT-PCR檢測(cè)siRNA干擾后骨肉瘤細(xì)胞MG-63中PKM2表達(dá)水平(*表示與無關(guān)序列組比較差異顯著;#表示與正常對(duì)照組比較差異顯)

序列,單核細(xì)胞,受體,序列


圖 3 流式細(xì)胞檢測(cè)單核細(xì)胞表面的 CD209 受體相對(duì)比例(*表示與無關(guān)序列組比較差異顯著;#表示與正常對(duì)照組比較差異顯表 5 流式細(xì)胞檢測(cè)單核細(xì)胞表面受體 CD209 的相對(duì)比例ups 1 2 3 均數(shù)± KB 組 0.35 0.30 0.29 0.31 NC 組 0.22 0.31 0.28 0.27 si609 組 0.12 0.13 0.14 0.13示與無關(guān)序列組比較差異顯著;#表示與正常對(duì)照組比較差異顯)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3227598

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