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成骨細胞靶向敲除Wnt5a對小鼠骨關(guān)節(jié)炎軟骨及軟骨下骨的影響

發(fā)布時間:2021-06-07 00:54
  目的 通過在Cre-LOXP系統(tǒng)靶向敲除成骨細胞Wnt5a的小鼠,建立型膠原酶Ⅶ誘導的骨關(guān)節(jié)炎模型,觀察Wnt5a在成骨細胞敲除后在該模型中對軟骨和軟骨下骨的影響。方法 通過OCN-Cre、Wnt5afl/fl小鼠交配,經(jīng)PCR測其基因型,獲得OCN-Cre+;Wnt5afl/fl(KO)基因型和Wnt5afl/fl(WT)基因型小鼠。取3月齡SPF級KO和同批生產(chǎn)的WT雄性小鼠各12只,隨機分為vehicle+WT組、vehicle+KO組、collagenase+WT 組和 collagenase+KO 組 四 組。collagenase+WT 組和collagenase+KO組小鼠右側(cè)膝關(guān)節(jié)于實驗開始的0,2天分別注射1U Ⅶ型膠原酶((Sigma-Aldrich)),左側(cè)膝關(guān)節(jié)注射等劑量生理鹽水處理。所有小鼠6周后處死,通過免疫組化觀察成骨細胞表達Wnt5a情況(再次確定基因型)。經(jīng)大體觀察、甲苯胺藍染色觀察膝關(guān)節(jié)軟骨組織學改變并進行評分。經(jīng)HE染色觀察軟骨組織學改變。用微計算機斷層掃描技術(shù)測定軟骨下骨骨量和微觀結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果 大體觀察及評分顯示:vehicle+WT組和veh... 

【文章來源】:華北理工大學河北省

【文章頁數(shù)】:59 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

成骨細胞靶向敲除Wnt5a對小鼠骨關(guān)節(jié)炎軟骨及軟骨下骨的影響


Wnt5a免疫組織化學染色

脛骨,軟骨


華北理工大學碩士學位論文-16-發(fā)生改變(如圖5)。根據(jù)甲苯胺藍染色進行脛骨軟骨OARSI評分,評分結(jié)果顯示:與vehicle+WT組相比,collagenase+WT組評分顯著增高(p<0.05);與vehicle+KO組相比,collagenase+KO組評分顯著增高(p<0.05),與collagenase+WT組相比,collagenase+KO組評分無顯著差異(如圖6)。A.vehicle+WT組;B.vehicle+KO組C.collagenase+WT組D.collagenase+KO組圖3脛骨軟骨損傷大體觀察圖4脛骨軟骨損傷大體評分

脛骨,軟骨


華北理工大學碩士學位論文-16-發(fā)生改變(如圖5)。根據(jù)甲苯胺藍染色進行脛骨軟骨OARSI評分,評分結(jié)果顯示:與vehicle+WT組相比,collagenase+WT組評分顯著增高(p<0.05);與vehicle+KO組相比,collagenase+KO組評分顯著增高(p<0.05),與collagenase+WT組相比,collagenase+KO組評分無顯著差異(如圖6)。A.vehicle+WT組;B.vehicle+KO組C.collagenase+WT組D.collagenase+KO組圖3脛骨軟骨損傷大體觀察圖4脛骨軟骨損傷大體評分


本文編號:3215504

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